Question

铜仁一中正在申报省级一类示范性高中，学校打算以学生为主体，教师协助的方式建立微生物实验室，以丰富学生的生命科学实验内容．请回答下列问题：
（1）对微生物实验室进行清扫和消毒处理，准备微生物培养所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种微生物菌种．对买回来的菌种进行扩大培养，首先制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，所需的原料除了牛肉膏和蛋白胨之外还需要

 

，牛肉膏和蛋白冻的作用是

 

．将配制好的培养基分装到三角瓶中，用两层牛皮纸扎紧瓶口后置于

 

中灭菌．
（2）实验室中需要的微生物也可以自己培养，方法为：取土壤1g溶解，用相应的培养基将土壤稀释液中的微生物进行分离纯化保留菌种即可．分离纯化时选用的培养基从功能上来说属于

 

培养基．
（2）由于微生物的营养类型复杂，不同的微生物对营养物质的需求是不同的．如果培养能进行光合作用的微生物，培养基中的不需要加入的是

 

源，如果培养能进行固氮作用的微生物，培养基中的不需要加入的是

 

源．
（3）饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用．若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等．如图示学生们从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程．

该过程中，微生物的接种方法是

 

，接种以前进行的一系列稀释操作，目的是在培养皿表面形成

 

．根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大致推测出样品中的活菌数．如果一培养基上有3个菌落，则1g土壤中大致的活菌数量是

 

．由于植酸钙的不溶解性，使培养基形成白色浑浊．产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶．实验结果说明

 

．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,培养基对微生物的选择作用

专题：

分析：（1）培养基的成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子．
（2）常用的灭菌方法有干热灭菌、高压蒸汽灭菌和灼烧灭菌．
（3）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体-菌落．

解答： 解：（1）培养基的成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源和生长因子，牛肉膏和蛋白胨可以提供碳源、氮源和生长因子，配置好的培养基应用高压蒸汽灭菌．
（2）培养基从功能来分有选择培养基和鉴别培养基，分离纯化时选用的培养基从功能上来说属于选择培养基．
（3）能进行光合作用的微生物能利用二氧化碳，故培养基中不加有机碳源，能进行固氮作用的微生物，能自身固氮，培养基中的不需要加入的是氮源．
（4）图示的接种方法为稀释涂布平板法，经过一系列稀释操作，目的是在培养皿表面形成由单个细菌繁殖而来的单个菌落，据此可以推测计算原来的活菌数，也可以用于菌种的提纯．1g土壤中大致的活菌数量是3÷0.1×10×10×10×100=3×10⁶个．由于根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶，周围有透明区域的菌落可以产植酸酶，由图可以看出ACE菌落均能产生植酸酶，但E产生植酸酶的效果较好．
故答案为：（1）水、无机盐、琼脂    提供碳源、氮源（和生长因子）  高压蒸汽灭菌锅
（2）选择
（3）碳源    氮源
（4）稀释涂布平板法    单个菌落   3×10⁶个   ACE菌落均能产生植酸酶，但E产生植酸酶的效果较好

点评：本题主要考查了微生物的培养的相关知识，意在考查考生能识记并理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成一定知识网络的能力，试题难度一般．