Question

【题目】葡萄酒酵母（C1)具有良好的发酵性能，但分解苹果酸能力差，过多的苹果酸会使葡萄酒有酸涩感，解苹果酸裂殖酵母（Ml)具有极强的降解苹果酸能；但发酵性能极差。为了培育新型酵母菌菌种，科研人员采用了以下步骤进行育种。请分析回答：

（1）步骤一：制备原生质体。培养Cl、Ml单倍体亲株，加入一定量的0.5%的蜗牛酶液，保温处理一段时间，用一定浓度的高渗缓冲液洗涤，以确保获得更多的原生质体。

①本实验中，蜗牛酶液的作用是______________。

②在无菌条件下，用___________(A：高渗缓冲液、B:低渗缓冲液、C：生理盐水）洗涤，以确保获得更多的原生质体。

③改变蜗牛酶液浓度进行多组实验，结果见图1,分别计算酶浓度为1和1.5时的形成率与再生率，相比较酶浓度为_______________时更适宜。

（2）步骤二：诱导原生质体融合。取Cl、Ml原生质体悬浮液等量混合，离心去除上清液，加入一定量40%的_________溶液,30℃保温20min，镜检并观察融合情况。

（3）步骤三：融合子的鉴定。测定细胞体积及DNA含量，结果见表1,从中挑选出融合子Z13、Z15、Z19、Z29,理由是_____________。

（4）步骤四：融合子发酵性能的测定。测定融合子与亲株的降糖能力和降酸能力，图2和图3是对Z29和亲株的测定结果，据图分析可以得出的结论是__________的降糖能力和降酸能力均较好，表明 _________。

Answer 1

【答案】 去除细胞壁 A 1.5% 聚乙二醇（PEG） 细胞中DNA含量与两亲本的DNA含量之和接近（DNA含量为4或DNA含量在4左右、接近4） Z29 融合了两亲株的优良性状

【解析】试题分析：本题考查细胞工程，考查对细胞融合方法的理解与识记，考查图表曲线的分析能力。解答此类题目应明确研究目的和研究对象，从曲线图或表格中提取相关信息。

（1）①酵母菌具有细胞壁，本实验中，蜗牛酶液的作用是去除细胞壁。

②在无菌条件下，用高渗缓冲液洗涤，可以避免原生质体不破裂，以确保获得更多的原生质体。

③酶浓度为1.5％时再生率较高，更适宜进行实验。

（2）步骤二：聚乙二醇（PEG）可以促进细胞融合。

（3）融合子Z13、Z15、Z19、Z29细胞中DNA含量与两亲本的DNA含量之和接近（DNA含量为4或DNA含量在4左右、接近4），属于杂合细胞。

（4）据图2可知，Z29比M1降糖能力强，具图3可知，Z29降酸能力比双亲均强，说明Z29的降糖能力和降酸能力均较好，表明Z29融合了两亲株的优良性状。