分析 基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.
解答 解:(1)图中A表示基因表达载体的构建过程,该过程中需要先用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体,其次还需要用DNA连接酶将目的基因与运载体连接形成重组DNA分子;根据题干信息“导入到大鼠神经干细胞中”可知,该基因治疗的受体细胞为神经干细胞.
(2)基因工程的核心步骤是构建基因表达载体.
(3)质粒上有XhoⅠ识别位点,而且在启动子之后,所以要构建含GDNF基因的表达载体,应选用XhoⅠ限制酶进行酶切.
(4)A、该质粒中含有限制酶XhoI的切割位点,且切割位点不在标记基因上,可作为基因的运载体,A正确;
B、该质粒不含标记基因,不可位于基因的运载体,B错误;
C、该质粒含有标记基因和限制酶HpaI,但切割位点位于标记基因上,用该酶切割后会破坏标记基因,因此不能作为基因的运载体,C错误;
D、该质粒含有标记基因和限制酶XhoI,但切割位点位于标记基因上,用该酶切割后会破坏标记基因,因此不能作为基因的运载体,D错误.
故选:A.
(5)A.限制性核酸内切酶具有特异性,一种限制酶只能识别特点的DNA序列,并在特定的位点进行切割,A错误;
B.限制性核酸内切酶的作用是切断脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键,而RNA聚合酶的作用是在核糖核苷酸之间形成磷酸二酯键,B错误;
C.使用质粒运载体是为了将目的基因导入受体细胞,避免目的基因被分解,C正确;
D.质粒运载体可能是由细菌的DNA改造形成的,但不是由病毒的DNA改造形成的,D错误.
故选:C.
(6)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有三种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示).为鉴定这3种连接方式,选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切,若属于载体自连,且产生的酶切片段只有一种;若是正向连接的重组载体,其产生的酶切片段数为2个,且长度分别与质粒和GDNF基因长度相同;若是反向连接的重组载体,经过BamHⅠ酶切后产生两种长度的片段,即200bp和6500bp.
故答案为:
(1)限制酶和DNA连接酶 神经干细胞
(2)构建基因表达载体
(3)XhoⅠ
(4)A
(5)C
(6)2 ②⑥
点评 本题考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤等,掌握各步骤中的相关细节,能结合所学的知识准确答题,属于考纲理解和应用层次的考查.
科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 效应T细胞能裂解靶细胞并直接清除靶细胞中抗原 | |
B. | 浆细胞与效应T细胞中的基因不同 | |
C. | 吞噬细胞、B细胞、T细胞、记忆细胞都是免疫细胞 | |
D. | 浆细胞在特异性识别抗原后,自身合成并分泌抗体来消灭抗原 |
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科目:高中生物 来源: 题型:解答题
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 复制均在细胞核内进行 | |
B. | 解旋和脱氧核苷酸的逐一连接均要消耗能量 | |
C. | 复制只需要解旋酶 | |
D. | DNA的复制过程中碱基A的消耗量等于碱基G的消耗量 |
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科目:高中生物 来源: 题型:选择题
A. | 自由水和结合水 | B. | 自由水和自由水 | C. | 结合水和结合水 | D. | 结合水和自由水 |
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科目:高中生物 来源: 题型:解答题
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科目:高中生物 来源: 题型:解答题
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