Question

已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加聚乙二醇促融，获得杂种细胞。请完成下列问题：

（1）试管中除融合的杂种细胞外，还有_________种融合细胞。

（2）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，并说明原理。

方法：________________________________________________________________________。

原理：________________________________________________________________________。

（3）将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养，获得A、B、C三细胞株。各细胞株内含有的人染色体如下表（“+”代表有，“-”代表无），测定各细胞株中人体所具有的五种酶的活性。

细胞株	人染色体编号
	1	2	3	4	5	6	7	8
A株	+	+	+	+	-	-	-	-
B株	+	+	-	-	+	+	-	-
C株	+	-	+	-	+	-	+	-

结果是：①B株有a酶活性；②A、B、C株均有b酶活性：③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均无e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因影响，则支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的_________、_________、_________、_________和_________号染色体上。

Answer 1

（1）2

（2）培养液中加入氨基嘌呤，收集增殖细胞  加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中，可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖

（3）6  1  2  7  8

解析:

此题属于信息题，已知的信息是DNA含有D和S两条途径，人的淋巴细胞S和D途径都有，一般不分裂，骨髓瘤细胞只有D途径，此途径容易被氨基嘌呤阻断，阻断后也不进行细胞分裂。把淋巴细胞和骨髓瘤细胞放于一个试管中加入PEG或灭活的病毒等促融物后，有的细胞就融合为一体，融合情况是淋巴细胞与淋巴细胞、淋巴细胞与骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合。只有D途径的骨髓瘤细胞及骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合的细胞可被氨基嘌呤阻断，淋巴细胞及淋巴细胞和淋巴细胞融合的细胞不分裂，在培养液中加入氨基嘌呤能继续分裂的细胞就是杂交瘤细胞。第（3）小题从A、B、C株均有b酶活性可知，控制合成b酶的基因在1号染色体上，A、B、C均无e酶活性可知控制e酶活性的基因在第8号染色体上，A、B有c酶活性，可知在2号染色体上，依此方法得6、1、2、7、8。