Question

13．某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养．下列叙述正确的是（　　）

• A． 制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块
• B． 恒温培养箱中的CO₂浓度维持在10%左右，以维持培养液正常pH
• C． 为了保证细胞培养所需的无毒环境，需大量添加各种抗生素
• D． 本实验应设置对照实验，以检测药物对甲、乙的毒性大小

Answer 1

分析 本题主要考查动物细胞培养的相关知识．
1、动物细胞培养的过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．
2、培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．（3）温度和PH．（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO₂（维持培养液的pH值）．

解答 解：A、在利用肝组织块制备肝细胞悬液时，常用胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶需要在强酸环境下才能起作用，但这样的环境不适于细胞生存，A错误；
B、细胞培养应在含C0₂恒温培养箱中进行，C0₂的作用是维持培养液的pH值，B错误；
C、抗生素是用来杀菌的，不是杀病毒的，C错误；
D、本实验应设置对照实验，用添加甲药物、乙药物的培养液分别培养细胞，根据变异细胞占培养细胞的比例，以检测药物对甲、乙的毒性大小，D正确．
故选：D．

点评 本题考查动物细胞培养的相关知识，意在考查学生的识记和理解能力，难度不大．