Question

4．如表为培养某种微生物的培养基配方，请回答有关问题：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	蒸馏水
在1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	定容1000mL

（1）根据配方可知该培养基只允许分解尿素的细菌生长，从功能上看，这种培养基被称作选择培养基．为防止杂菌污染，对培养基采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌．
（2）若要通过统计培养基中菌落数来估计样品中的细菌数，上述培养基中还需要添加凝固剂（或琼脂），接种时应采用稀释涂布平板法．该方法接种培养后的菌落如图，其中适合用于计数的平板是C．

（3）某同学涂布平板时用0．lmL稀释液，稀释液的稀释倍数为10⁵，平板中测得菌落数的平均值为163，则每1mL样品中的细菌数约是1.63×l0⁸个．从土壤中分离出分解尿素的细菌后，要对其作进一步的鉴定，可在上述培养基中加入酚红指示剂．

Answer 1

分析 1、选择培养基是在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长．
2、稀释涂布平板法计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内．经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数．

解答 解：（1）该培养基以尿素为唯一氮源，只允许分解尿素的细菌生长，故这种培养基称为选择培养基．培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌．
（2）若要通过统计培养基中菌落数来估计样品中的细菌数，需用固体培养基，故上述培养基中还需要添加琼脂作为凝固剂，接种时应采用稀释涂布平板法法．用稀释涂布平板法测定细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30～300的进行记数，因此图中C平板适合用于计数．
（3）某同学涂布平板时用0．lmL稀释液，稀释液的稀释倍数为10⁵，平板中测得菌落数的平均值为163，则每1mL样品中的细菌数约=163÷0.1×10⁵=1.63×l0⁸个．从土壤中分离出分解尿素的细菌后，要对其作进一步的鉴定，可在上述培养基中加入酚红指示剂．
故答案为：
（1）尿素     选择     高压蒸汽灭菌
（2）凝固剂（或琼脂）      稀释涂布平板法    C
（3）1.63×l0⁸ 酚红指示剂

点评 本题考查了微生物培养技术的相关知识，考生要明确选择培养基的选择作用，识记培养基为微生物提供的营养成分，识记常用的接种方法和具体操作过程，对于微生物培养技术的掌握及分解尿素的菌的分离和计数的掌握应用是解题的关键．