Question

【题目】目前广泛应用的新型冠状病毒检测方法是实时荧光RT-PCR技术。RT—PCR是将RNA逆转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增反应相结合的技术，具体过程如图所示，下列说法不正确的是（ ）

A.引物A与引物B应该具有不同的碱基序列

B.过程Ⅱ通过控制温度的变化实现目标序列的循环扩增

C.该反应体系中应加入缓冲液、引物、四种核糖核苷酸、逆转录酶、Taq酶等物质

D.该检测方法的应用依赖于新型冠状病毒特异性序列的确定

Answer 1

【答案】C

【解析】

1、分析图示，过程Ⅰ是由mRNA形成cDNA的过程，表示逆转录。过程Ⅱ先使mRNA-cDNA杂合双链解开，再以单链的DNA合成双链的DNA，最后利用RCR技术进行DNA复制。

2、PCR技术的原理是模拟生物体内DNA分子复制的过程，利用DNA分子热变性原理，通过控制温度控制DNA分子的解聚和结合，DNA分子体内复制过程DNA的解旋是在解旋酶的作用下实现的；PCR扩增DNA片段过程最高经过n次扩增，形成的DNA分子数是2n个，其中只有2条单链不含有引物。

A、引物A与引物B分别结合在目的片段序列的两端，其碱基序列不同，A正确；

B、过程Ⅱ为PCR的反应阶段，通过控制温度的变化实现变性、退火、延伸，实现目标序列的循环扩增，B正确；

C、RT-PCR反应体系中应加入缓冲液、引物、四种脱氧核糖核苷酸、逆转录酶、Taq酶等物质，而不是四种核糖核苷酸，C错误；

D、RT-PCR的前提条件是目的片段的特异性序列的确定，D正确。

故选C。