Question

研究表明，PES1基因可能参与细胞的转化和癌变，从而与肿瘤的发生发展有关．为了进一步研究PES1的生物学功能，研究人员将PES1基因与谷胱甘肽S转移酶基因（即GST基因．GST可催化谷胱甘肽与多种环氧化合物结合）融合，并制备了PES1的单克隆抗体，其流程图如图所示：

（1）图中的①表示

 

技术，X细胞是指

 

细胞．
（2）研究人员在将pGEX-PES1表达载体导入大肠杆菌的同时，也将pGEX-KG载体导入另一组同种的大肠杆菌．在基因表达后，用

 

（“GST抗体”或“PES1蛋白抗体”）进行抗原-抗体杂交，通过比较两组中所检测的蛋白质的相对分子质量确定基因融合是否成功．
（3）进行GST-PES1融合蛋白的分离和纯化时，可利用GST与

 

之间酶和底物的特异性结合，从而将GST-PES1融合蛋白与其他蛋白分离．
（4）制备的抗PES1蛋白单克隆抗体具有

 

的特点，可用于检测PES1基因在不同的人肿瘤细胞的表达．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,单克隆抗体的制备过程

专题：

分析：分析题图：图示表示制备单克隆抗体PES1的流程，其中①表示采用PCR技术体外大量扩增PES1基因；其次构建pGEX-PES1表达载体；再将基因表达载体导入大肠杆菌细胞，并分离和纯化GST-PES1融合蛋白；最后制备单克隆抗体PES1．

解答： 解：（1）①表示体外大量扩增PES1基因，常采用PCR技术；X是B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞．
（2）无论基因是否融合，受体细胞都会产生PES1蛋白，但只要含有融合基因的受体细胞才能表达产生GST蛋白，因此在基因表达后，用GST抗体进行抗原-抗体杂交，通过比较两组中所检测的蛋白质的相对分子质量确定基因融合是否成功．
（3）根据题干信息“GST可催化谷胱甘肽与多种环氧化合物结合”可知，进行GST-PES1融合蛋白的分离和纯化时，可利用GST与谷胱甘肽之间酶和底物的特异性结合，从而将GST-PES1融合蛋白与其他蛋白分离．
（4）单克隆抗体的特点：特异性强、灵敏度高．
故答案为：
（1）PCR   　杂交瘤
（2）GST抗体
（3）谷胱甘肽
（4）特异性强、灵敏度高

点评：本题结合图解，考查基因工程和单克隆抗体的制备等知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记单克隆抗体的制备过程及单克隆抗体的特点，能结合图中和题中信息准确答题．