Question

（知识迁移题）依据基因工程技术有关原理回答下列问题：

（1）限制性内切酶是在基因工程中用来切开DNA的酶，EcoRI是大肠杆菌的R型菌株分离而来的限制性核酸内切酶，它总是在一定的碱基序列中切断DNA。以下的碱基序列表示的是EcoRI的识别序列，请用虚线在下图中画出EcoRI的作用部位：

G　A　A　T　T　C

C　T　T　A　A　G

（2）基因工程操作的基本步骤是：a________，b________，c________，d________。

（3）获取目的基因途径有________、________。

（4）下图是将人类的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图，所用的载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒导入细菌B后，其上的基因能得到表达。请回答下列问题：

①简述重组质粒的主要过程：________。

②导入细菌B细胞的目的基因成功表达的标志是

什么？________。

（5）假如预期到某种酶的功能，要设计相应的基因，下列图示中

①是________，②是________。

Answer 1

答案：
解析：

答案（1） 　　（2）获取目的基因：构建基因表达载体　将目的基因导入受体细胞　目的基因的检测与鉴定 　　（3）物种分离　人工合成 　　（4）①用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个有黏性末端的切口；用同种限制酶切割目的基因，产生相同的黏性末端；将切下的目的基因片段插入到质粒的切口处，再加入适量的DNA连接酶，使质粒与目的基因结合成重组质粒　②受体细胞通过转录、翻译合成相应的蛋白质，即人的生长激素 　　（5）分子设计　氨基酸序列多肽链解题探究　本题考查基因工程与蛋白质工程。基因工程操作的基本步骤包括目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定四个步骤。限制性内切酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。提取目的基因主要有两条途径：一条是从供体细胞的DNA中直接分离基因；另一条是人工合成目的基因。目的基因与运载体结合：将目的基因与运载体结合的过程，实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。蛋白质工程的原理是：预期功能→蛋白质三维结构→氨基酸序列（多肽链）→基因→具有预期功能的蛋白质。