Question

2008年我国某地由于柑橘大实蝇的危害，使橘农遭受到了很大的损失，当地政府想尽一切办法帮助橘农尽量减少损失．
（1）某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用组织培养技术大量繁殖，该技术应先将离体的柑橘组织或细胞培养一段时间，使其通过

 

分裂方式形成愈伤组织，此过程称之为

 

，然后继续培养，又可以重新长成根或芽等器官，这一过程称之为

 

．
（2）组织培养的选材非常关键，植物材料的选择直接关系到实验的成败．若用花药进行离体培养，则应选择花粉发育至

 

期的花药培养成功率最高．选择花粉时，一般要通过

 

来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，常用的染色剂是

 

．产生花粉植株一般有两种途径；一种是花粉通过

 

阶段发育为植株；另一种是花粉在

 

培养基上先形成愈伤组织，再分化成植株．这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中

 

．
（3）影响植物组织培养的因素很多，其中最关键的激素有

 

和

 

．
（4）无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌？
①培养基，②培养皿，③接种环，④花蕾，⑤实验操作者的双手，⑥三角锥形瓶．

 

（填编号）需要灭菌，

 

（填编号）需要消毒．

Answer 1

考点：植物培养的条件及过程

专题：

分析：本题主要考查植物组织培养的知识．
植物组织培养是指利用特定的培养将离体的植物细胞、组织或器官培养成完整植株的过程，所以花药的离体培养、基因工程中的受体细胞的培养、植物体细胞杂交后杂种细胞的培养以及植物的大量快速繁殖都要用到植物组织培养技术．植物组织培养的过程是外植体

脱分化

愈伤组织

再分化

根、芽→试管苗．脱毒植物苗的取材一般是幼嫩的芽或茎，主要是这些部位不带病毒．植物组织培养过程中，生长素和细胞分裂素同时使用时，两者用量的比例影响着细胞的发育方向（或分化）．培养中必须具备植物激素、无机物（矿质元素）、有机物等营养物质．愈伤组织的特点是细胞排列疏松而无规则、呈无定形状态．

解答： 解：（1）植物组织培养中细胞发生的是有丝分裂，细胞经脱分化形成愈伤组织，经再分化形成完整个体．
（2）单核期花粉对离体刺激敏感，选用该期花粉可提高培养的成功率，选择花粉时可用显微镜观察、筛选；对花粉细胞核染色应该选择碱性染料，常用醋酸洋红．产生花粉植株一般有两种途径；一种是花粉通过胚状体阶段发育为植株；另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再分化成植株．细胞培养成植株的两条途径取决于植物激素的种类及比例，尤其是生长素和细胞分裂素．
（3）影响植物组织培养的因素很多，其中最关键的激素有生长素和细胞分裂素．在培养基中生长素与细胞分裂素的用量比值不同，诱导生根发芽结果不同，当比值低时，有利于发芽，比值高时，有利于生根．
（4）灭菌对象为培养基和实验器材，消毒对象为要保持活性的材料和实验者自身．
故答案为：
（1）有丝        脱分化       再分化
（2）单核        镜检（显微镜观察）       醋酸洋红       胚状体       诱导      激素的种类及其浓度配比
（3）生长素      细胞分裂素
（4）①②③⑥④⑤

点评：本题主要考查学生对植物组织培养相关知识的记忆和理解能力．在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要的条件：①消毒灭菌；②一定浓度的植物激素；③适宜的温度；④充足的养料．植物组织培养中植物激素使用：物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素；同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向；先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化．消毒和灭菌：外植体可以用酒精消毒；操作前手需用酒精消毒；培养基需用高压蒸汽灭菌．