Question

【题目】已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下：

（1）实验步骤①所代表的反应过程是__________________________________。

（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制鞋内切酶和酶，后者的作用出是将限制性内切酶切割的_________和___________连接起来。

（3）如果省略步骤③而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能_____________，也不能_________________________。

（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用_________与___________进行抗原一抗体特异性反应实验，从而得出结论。

（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基序列_____________（相同、不同），根本原因是____________________________________。

Answer 1

【答案】（1）感受态 （2）DNA连接 载体 S基因 （3）复制 合成S基因的mRNA（或转录）

（4）大肠杆菌中表达的S蛋白 SARS康复病人血清（5）相同 表达蛋白质所用的基因相同

【解析】试题分析：（1）目的基因表达载体导入微生物细胞需要用Ca2+处理，使之处于易于接受外源DNA的感受态。

（2）根据目的基因表达载体要用限制酶切割质粒，使之具有与目的基因相同的粘性末端，再用DNA连接酶将质粒粘性末端和目的基因连接为重组质粒。

（3）如果直接将目的基因导入受体细胞，会被分解，不能保存、复制和表达。

（4）将S蛋白与抗S蛋白的特异性抗体进行抗原—抗体特异性反应实验，如果形成杂交带，说明S蛋白与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性。

（5）由于都是S基因，表达的S蛋白质相同。