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    分析回答有关生物工程中的问题：日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白(GFP)等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图。据图回答：
    (1)绿色荧光蛋白基因在该实验中是作为_______基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶I的识别序列和切点是-G'GATCC-，请画出质粒被限制酶Ⅰ切割所形成的黏性末端的过程：___________。
    (2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是________。
    (3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是____________。
    (4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是(用数字表示)：_____________。
    ①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸；②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计；③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)；④表达出蓝色荧光蛋白。
    (5)在培养重组细胞时，培养液中通常含有___________、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
    (6)以上培育过程中应用到的生物技术有__________等(至少答出三项)。
    (1)目的  
    (2)显微注射技术
    (3)为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因
    (4)②①③④
    (5)葡萄糖
    (6)转基因技术、核移植技术、动物细胞培养技术、胚胎移植技术
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    分析回答有关生物工程中的问题：

    日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白（GFP）等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图．据图回答：

    （1）绿色荧光蛋白基因在该实验中是做为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶I的识别序列和切点是—G’GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的过程：________________________                                 

     _________。

    （2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是_______________                              ___。

    (3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_______________________。

    (4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（用数字表示）：_______              ___                            。

    ①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。

    (5)在培养重组细胞时，培养液中通常含有_____________、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。

    (6)以上培育过程中应用到的生物技术有_________________________________等（至少答出三项）。

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    科目：高中生物 来源：2011届上海市嘉定区高三上学期第一次质量调研生物试卷 题型：综合题

    分析回答有关生物工程中的问题：（8分）
    日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白（GFP）等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图．据图回答：

    （1）绿色荧光蛋白基因在该实验中是做为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶I的识别序列和切点是—G’GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的过程：________________________                                 
     _________。
    （2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是_______________                              ___。
    (3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_______________________。
    (4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（用数字表示）：_______              ___                           。
    ①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。
    (5)在培养重组细胞时，培养液中通常含有_____________、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
    (6)以上培育过程中应用到的生物技术有_________________________________等（至少答出三项）。

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    科目：高中生物 来源：2013届安徽省高二下学期5月月考生物试卷（解析版） 题型：综合题

    回答有关生物工程的问题。（8分）

    小鼠是实验室常用的实验动物，如：利用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体、利用小鼠进行DNA重组研究中导致了“基因敲除”技术的出现。

    用小鼠制备抗X病毒单克隆抗体。

    （1）．将小鼠等分为两组，甲组定期间隔注射适量的含X病毒的溶液，其目的是____________________；乙组注射________________（作对照）。

    （2）．为了保存有价值的杂交瘤细胞系，通常用超低温将其冻存，请分析其原因____________

    ___________________。

        用小鼠进行DNA重组研究中形成的“基因敲除”技术，能“敲除”DNA分子上的特定基因。该技术的主要过程如下：

    第一步：分离小鼠胚胎干细胞，这些细胞中含有需要改造的基因，称“靶基因”。

    第二步：获取与“靶基因”同源的DNA片断，利用特定技术在该DNA片段上插入neoR基因（新霉素抗性基因）成为突变DNA（如下图），使该片段上的靶基因失活。

    第三步：将插入neoR基因（新霉素抗性基因）的靶基因转移入胚胎干细胞，再通过同源互换，用失活靶基因取代两个正常靶基因中的一个，完成对胚胎干细胞的基因改造。

    第四步：将第三步处理后的胚胎干细胞，转移到特定培养基中筛选培养。

    其基本原理如下图所示：

    （3）．第二步中neoR基因插入靶基因使用的工具酶是                      。neoR基因不仅能使靶基因失活，还可作为        ；“靶基因失活”的根本原因是             。

    （4）．从研究者成功获得如上图所示的“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞，到将该细胞培育成“基因敲除”小鼠，运用到的生物技术有            、              等。

     

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    科目：高中生物 来源：2010-2011学年上海市嘉定区高三上学期第一次质量调研生物试卷 题型：综合题

    分析回答有关生物工程中的问题：（8分）

    日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白（GFP）等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图．据图回答：

    （1）绿色荧光蛋白基因在该实验中是做为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶I的识别序列和切点是—G’GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的过程：________________________                                 

     _________。

    （2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是_______________                              ___。

    (3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_______________________。

    (4)目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（用数字表示）：_______              ___                            。

    ①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。

    (5)在培养重组细胞时，培养液中通常含有_____________、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。

    (6)以上培育过程中应用到的生物技术有_________________________________等（至少答出三项）。

     

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