Question

【题目】酵母菌是对青霉素不敏感的异养型生物，种类繁多，给人类生活带来了许多益处。回答问题：

（1）制作果酒过程中，除将温度控制在____________外，往往还需要先通气，后密封，酒精发酵的反应方程式是_____________。

（2）在工业发酵时，培养酵母菌的培养基中需要添加青霉素，目的是_____________。

（3）酵母菌生长需要适宜的pH，因此在培养基配制过程中需要添加pH缓冲剂以维持pH相对稳定，原因是_____________。

（4）采用平板划线法分离样液中的酵母菌时，接种环需通过______________的方法灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做是为了_____________。若经一段时间培养，发现有的线上长满了菌落，有的线上无菌落，造成这种现象的原因可能是_____________（答出一项即可）。

Answer 1

【答案】18~25℃ +能量 抑制细菌等杂菌的生长 酵母菌培养过程中积累了大量代谢产物，导致pH下降 灼烧灭菌法 使聚集的菌体逐步减少，以便获得单个酵母菌形成的菌落 划线操作时接种环灼烧后未冷却；未从上一次划线末端开始划线。

【解析】

1.微生物接种常用的两种方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

2.果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，20℃左右，酒精发酵时，一般将温度控制在18~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。

（1）由分析可知：制作果酒过程中，除将温度控制在18~25℃外，往往还需要先通气，目的是让酵母菌在有氧的条件下大量繁殖，而后密封是为了创造无氧条件，让酵母菌进行无氧呼吸，酒精发酵的反应方程式是：+能量

（2）在工业发酵时，培养酵母菌的培养基中需要添加青霉素，目的是抑制细菌等杂菌的生长，保证酵母菌的更好的发酵条件。

（3）酵母菌生长需要适宜的pH，酵母菌培养过程中积累了大量代谢产物，导致pH下降，从而影响到酵母菌的生长，因此在培养基配制过程中需要添加pH缓冲剂以维持pH相对稳定。

（4）采用平板划线法分离样液中的酵母菌时，接种环需通过灼烧灭菌法进行灭菌；平板划线操作的目的是为了通过多次划线延伸，使菌种数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。因此在划线操作中从第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做使聚集的菌体逐步减少，以便获得单个酵母菌形成的菌落。划线操作过程中，每次灼烧接种环后必须冷却后再进行划线，如果划线操作时接种环灼烧后未冷却或未从上一次划线末端开始划线，会导致有的线上长满了菌落，有的线上无菌落的现象。