Question

12．尿素是一种高浓度氮肥用长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用．分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

KH2pO4	Na2HP04	MgS04•7H20	蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	l．Og	10．Og	l．Og	15．Og

（1）根锯培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌不能 （能/不能），原因是培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源．不能选择出只分解以尿素为氮源的微生物．
（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用稀释涂布平板法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目就能大约推测出样品中活菌数．
（3）接种前要对培养基进行灭菌．在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行．
（4）一同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液浓度过离，应当怎样操作才可避免此种现象？对菌液进行梯度稀释（加大稀释倍数）．
（5）从胡萝卜中提取胡梦卜素常用的方法是萃取法．对胡萝卜进行粉碎、干燥时，要特别注意干燥的温度和时间，以防止胡箩卜焦糊．提取过程中宜采用水浴方式加热，以保障安全．
（6）进行植物组织培养时，通常选用茎尖（芽类、根尖）分生组织进行培养可以获得不含病毒的脱毒苗．长出的丛芽需及时转移到诱导生根培养基上进行生根培养，与诱导丛芽培养基相比，诱导生根培养基中应增加生长素（激素）含量．

Answer 1

分析 1、尿素分解菌体内的脲酶能够将土壤中的尿素分解为氨才能被植物吸收利用，尿素分解菌属于细菌，筛选尿素分解菌需要使用以尿素为唯一碳源的选择培养基．微生物筛选与培养的关键是无菌操作，常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法．
2、植物有效成分的提取方法主要有蒸馏法、压榨法和萃取法．

解答 解：（1）据表分析，表中的蛋白胨可以为微生物的生存提供氮源，所以不能分离尿素分解菌；筛选纤维素分解菌需要以纤维素为唯一的碳源的选择培养基．
（2）固体培养基上的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法，稀释涂布平板法适用于微生物的统计计数，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目能够推测样品中的活菌数．
（3）培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌，微生物筛选与分离成功的关键是无菌操作．
（4）培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是菌液没有梯度稀释，浓度过高．要避免此种现象需要对菌液进行梯度稀释．
（5）胡萝卜素易溶于有机溶剂，从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是萃取法．对胡萝卜进行粉碎、干燥时，要特别注意干燥的温度和时间，以防止胡萝卜焦糊．有机溶剂都易于燃烧，所以提取过程中宜采用水浴方式加热，以保障安全．
（6）植物组织培养时选用茎尖或芽尖作为外植体的原因是茎尖或芽尖分生组织是无毒或少毒的，进行培养后可以获得不含病毒的脱毒苗．植物激素如生长素和细胞分裂素在植物生长发育过程中起很重要作用，生长素含量较高时，可以诱导根的分化，细胞分裂素含量较高时可以诱导芽的分化．因此，长出的丛芽需及时转移到诱导生根培养基上进行生根培养，与诱导丛芽培养基相比，诱导生根培养基中应增加生长素含量．
故答案为：
（1）不能    培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源
（2）稀释涂布平板    菌落数目
（3）灭菌无菌
（4）菌液浓度过离 对菌液进行梯度稀释（加大稀释倍数）
（5）萃取法温度  水浴
（6）茎尖（芽类、根尖）分生组织  生长素

点评 本题主要考查纤维素分解菌的筛选和植物组织培养技术的相关内容，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的判断．