Question

1．某生物兴趣小组开展探究实验，课题是“培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系”．
实验材料、用具：菌种和无菌培养液、试管、血球计数板 （计数室为1mm×1mm方格，由400个小格组成）、滴管、无菌水、台盼蓝染液（对活细胞无染色效果）、显微镜等．
酵母菌的显微计数方法：
①血球计数板：是带有微小方格刻度的玻璃片，用于在显微镜下对微生物的计数．
②将含有酵母菌的培养液滴在计数板上，计数一个方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算试管中的酵母菌总数．连续观察7d，并记录每天的数值．
根据以上叙述回答下列问题：
（1）本实验没有另设对照实验，原因是该实验在时间上形成前后对照．该实验需要（填“需要”或“不需要”） 重复实验，原因是避免实验偶然性带来的误差．
（2）在吸取培养液计数前，要轻轻震荡几次试管，原因是使酵母菌分布均匀．如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当采取的措施是稀释含有酵母菌的培养液．
（3）某同学第5天在使用血球计数板计数时做法如下：
①振荡摇匀试管，取1mL培养液并适当稀释（稀释样液的无菌水中加入了几滴台盼蓝染液）．
②先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸（吸水纸）吸去，制作好临时装片．
③显微镜下观察计数：在观察计数时只计不被（填“被”或“不被”）染成蓝色的酵母菌．在用血球计数板对某一稀释10倍样品进行计数时，发现在一个小方格内（盖玻片下的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为5，据此估算10mL培养液中有酵母菌2×10⁹个．

Answer 1

分析 探究培养液中酵母菌种群数量与时间变化关系的实验原理：
（1）酵母菌可以用液体培养基来培养，培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、pH、温度等因素有关，我们可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况．
（2）利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法，这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目，所以一般用于单细胞微生物数量的测定，由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的，所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数目．

解答 解：（1）本实验没有另设对照实验，原因是该实验在时间上形成前后对照．该实验需要重复实验，原因是避免实验偶然性带来的误差．
（2）在吸取培养液计数前，要轻轻震荡几次试管，使酵母菌分布均匀．如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当稀释含有酵母菌的培养液．
（3）②先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸（吸水纸）吸去，制作好临时装片．
③已知血球计数板的大方格为1mm×1mm，若盖玻片下经稀释10倍的培养液厚度为0.1mm，计数时一个小方格观察值为5，则10mL培养液中酵母菌的总数=一个小方格观察值÷1个小方格容积×稀释倍数×溶液体积=5÷（1mm×1mm×0.1mm÷400×10^-3）×10×10=2×10⁹个．
故答案为：
（1）该实验在时间上形成前后对照  　需要　 避免实验偶然性带来的误差（或其他合理答案）
（2）使酵母菌分布均匀  　   稀释含有酵母菌的培养液
（3）②盖玻片 　　  ③不被      2×10⁹

点评 本题难度适中，属于考纲中理解、应用层次的考查，考生在解答过程中要善于利用单一变量的理念分析实验表格，酵母菌数量的计算是考生的难点，在计算过程中要善于利用公式，平时练习过程中应加强此方面的训练．