【题目】胰岛素样生长因子－Ⅰ（IGF-Ⅰ）是一种活性蛋白多肽物质，它是人体内肝细胞、肾细胞、脾细胞等十几种细胞分泌的产物。某研究小组利用原核细胞表达、纯化IGF-Ⅰ，并制备其单克隆抗体。回答下列问题：
（1）以人的肝组织中的总RNA处理得到的_______为模板，加入针对IGF-Ⅰ的特异引物（如下图所示）进行PCR扩增，提取目的基因。正向引物中含有NdeⅠ酶的识别序列，逆向引物含有BamHⅠ酶的识别序列。已知NdeⅠ酶和BamHⅠ酶的识别序列均为6个核苷酸，则NdeⅠ酶和BamHⅠ酶的识别序列分别是________和_________。
正向引物为：5’-CGCATATGATGCACACCATGTCCTCCTC-3’
逆向引物为：5’-CGGGATCCCTACTTGCGTTCTTCAAATG-3’
（2）使用PCR扩增的目的基因构建基因表达载体，并用该表达载体转化大肠杆菌，通过纯化获取足量的IGF-Ⅰ。选择大肠杆菌作为受体细胞的原因是_____________。
（3）用IGF-Ⅰ处理免疫小鼠，一段时间后，处死免疫小鼠，采集血清备用。取小鼠脾细胞与_______细胞进行细胞融合得到多种杂种细胞。除对这些杂种细胞进行选择培养外，还需进行专一抗体检验。检验杂交瘤细胞的培养液时，需要进行对照实验：以检验__________作为阳性对照，以检验_______________和_____________作为阴性对照。
【答案】 cDNA -CATATG- -GGATCC- 单细胞、繁殖快、遗传物质相对较少 骨髓瘤 免疫小鼠的血清 未免疫小鼠的血清 骨髓瘤细胞的培养液
【解析】【试题分析】
本题主要考查基因工程和制备单克隆抗体的相关知识。需要先梳理相关知识，再结合题意进行分析作答。限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一个中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的，即呈回文序列。在制备单克隆抗体过程中，一般有两次筛选过程，第一次是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次是通过克隆化培养和抗体检测进一步筛选出能产生人们所需要抗体的杂交瘤细胞。据此答题。
（1）IGF-Ⅰ是人体内肝细胞、肾细胞、脾细胞等十几种细胞分泌的产物，所以可以从人的肝组织中的获取总RNA进行反转录得到cDNA，再以该cDNA为模板，加入针对IGF-Ⅰ的特异引物（如下图所示）进行PCR扩增，提取目的基因；限制性内切酶识别DNA序列中的回文序列，据此可推知NdeⅠ酶的识别序列是-CATATG-，BamHⅠ酶的识别序列是-GGATCC-。
（2）大肠杆菌属于原核生物，单细胞、繁殖快、遗传物质相对较少，因此常被用作基因工程的受体细胞。
（3）制备单克隆抗体时，首先取已免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合得到多种杂种细胞，然后对这些杂种细胞进行选择培养，并且进行专一抗体检验；检验杂交瘤细胞的培养液时，需要进行对照实验：以检验免疫小鼠的血清作为阳性对照，以检验未免疫小鼠的血清和骨髓瘤细胞的培养液作为阴性对照。
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【题目】下列生物构成一个群落的是
A. 一个池塘中的全部生物 B. 一个池塘中的全部鲫鱼
C. 一个池塘中的全部生物和无机环境 D. 一个池塘中的全部金鱼藻
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【题目】基因突变是生物变异的根本来源。下列关于基因突变特点的说法正确的是
A. 生物在个体发育的特定时期才可发生基因突变
B. 基因突变能定向形成新的等位基因
C. 低等生物和高等生物均可发生基因突变
D. 体细胞发生的基因突变一定不能遗传
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【题目】下列调查实验的操作方法中，对实验结果影响最小的是
①探究培养液中酵母菌的种群数量变化时，取样前没有将试管振荡
②探究生长素促进生根的最适浓度实验中，做正式实验时未设置空白对照
③样方法调查蒲公英种群密度时，在分布较稀疏的地区取样
④验证孟德尔分离定律时，所选的实验材料是否为纯合子
A. ①② B. ②④ C. ②③ D. ①④
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【题目】一片玉米农田就是一个生态系统。
（1）生态系统的稳定性是指生态系统所具有的_____________________的能力，与自然生态系统相比，玉米农田生态系统的_____________稳定性较低。
（2）玉米螟幼虫能蛀入玉米茎秆和果穗内取食。若调查玉米螟幼虫的密度，应釆用__________法。甜菜夜蛾幼虫也取食玉米，玉米螟和甜菜夜蛾的种间关系是___________。在我国北方部分地区，亚洲玉米螟和欧洲玉米螟的分布区出现重叠，两种玉米螟依靠不同的____________维持各自的繁衍。
（3）取两份等质量同品种的玉米粉，一份经发酵做玉米馒头，另一份煮玉米粥，这两份食物中所含能量较少的是玉米_____________，依据是_________________________________。
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【题目】阅读下面的材料，回答有关问题：
材料 澳洲草原广阔，天然牧草资源十分丰富。自1925年起，从印度和马来西亚引入当地没有的牛、羊等家畜，大力发展畜牧业。几年后，万头牛的粪便覆盖了草场，牧草大量枯死，同时蝇子蔓延，成为澳洲牧区的一大公害。整个澳洲草原生态系统处于崩溃的边缘。后来从亚洲引进蜣螂，它们把牛粪滚成团搬运到地下，既消除了牛粪又肥沃了土壤，还控制了蝇子，有效地解决了生态危机问题，使澳洲草原又呈现出生机蓬勃的景象。
(1)上述事实表明，在引进牛、羊前，各种生物之间的关系呈现________状态。
(2)从生态学的角度看，人们引进牛、羊的目的是____________________________________。
(3)引进牛、羊后导致生态危机的主要原因是________________________________________。
(4)蜣螂是这个草原生态系统的________功能类群的重要成分。
(5)以上事实说明，生态系统的自动调节能力是有______________________________________
(6)引进牛、羊产生生态危机这一事实给人们的启示是人类的生产活动必须________。
(7)最后结果给我们的启示是________________________________________。
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【题目】研究发现,内皮素分布不均是造成色斑的主要原因。内皮素拮抗剂进入皮肤,可以和黑色素细胞膜上的受体结合,使内皮素失去作用,这为美容研究机构带来了福音。分析可知,上述材料体现了细胞膜的哪种功能 ( )
A. 细胞膜中磷脂含量越高,功能越复杂
B. 细胞膜可控制物质进出细胞
C. 细胞膜具有信息交流的功能
D. 细胞膜的组成成分主要为磷脂和蛋白质
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【题目】马铃薯是重要的经济作物,人类在(马铃薯的)基因育种方面取得丰硕成果。
(1)马铃薯是双子叶植物,常用_________法将目的基因导入马铃薯体细胞中。构建好的基因表达载体包括目的基因、_____、______、_____、复制原点五部分。
(2)马铃薯得病会导致产量下降。基因工程中常用的抗病基因为______________(写一种即可)。
(3)科学家还培育出抗除草剂的转基因马铃薯,主要从两个方面进行设计:
①修饰除草剂作用的靶蛋白,使其对除草剂_____,或使靶蛋白过量表达,植物吸收除草剂后仍能正常代谢。
②引入酶或酶系统,在除草剂发生作用前______。
(4)将目的基因导入受体细胞后,还需对转基因植物进行___________。
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【题目】在寒意阵阵的隆冬季节人们既感觉到寒冷又容易感觉到饥饿，但人体的体温却基本稳定。请回答下列相关问题：
(1)当低温刺激体表的冷觉感受器时，受刺激部位的细胞膜内外两侧的电位是________，从而产生兴奋，兴奋沿传入神经传到_________形成冷觉。
(2)当人体感受到寒冷时，____分泌的促甲状腺激素释放激素（TRH） 增加，导致血液_____、_____（2种激素）的含量也增加，物质氧化分解加快，释放大量热量以维持体温，从而容易形成饥饿感。
(3)同时下丘脑发出信号，汗腺分泌________，毛细血管_________，减少散热。由此可见体温恒定是__________________相互协调地发挥作用的结果。
(4)正常人在隆冬季节的血糖浓度是____________g/L，这与胰岛素和___________（细胞）产生的胰高血糖素有关。
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