Question

已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能破氨基嘌呤阻断．人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖．鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，促融获得杂种细胞．请回答：
（1）试管中加入这两种细胞后，还要加入诱导剂，除融合的杂种细胞外，还有

 

种融合细胞，细胞融合所依据的原理是

 

．
（2）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，并说明原理：
方法：在培养液中加入

 

，培养后收集增殖细胞．
原理：培养液中加入该物质后，下列细胞中，不能生长的细胞有

 

（写序号），不能生长的原因是

 

，有的细胞能生长，原因是

 

．
①骨髓瘤细胞  ②融合的淋巴细胞  ③杂种细胞  ④融合的骨髓瘤细胞  ⑤淋巴细胞
（3）培养分离出的杂种细胞，培养液中除了有糖、氨基酸、水、无机盐、微量元素、促生长因子外，还必须添加

 

，同时还应控制好培养液的温度、

 

（至少写两点）等外界环境条件．若出现细胞的接触抑制时，应用

 

处理后分瓶培养．
（4）将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养，获得A、B、C三细胞株．各细胞株内含有的人染色体如表（“+”有，“-”无），测定各细胞株中人体所具有的五种酶的活性．结果是：①B株有a酶活性：②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均无e酶活性．若人基因的作用不受鼠基因的影响，则支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的第

 

号染色体上．

细胞株	人染色体编号
	1	2	3	4	5	6	7	8
A株	+	+	+	+	-	-	-	-
B株	+	+	-	-	+	+	-	-
C株	+	-	+	-	+	-	+	-

Answer 1

考点：单克隆抗体的制备过程,动物细胞与组织培养过程

专题：

分析：分析表格：B株具有a酶活性，所以支配a酶合成的基因位于5号染色体上；A、B、C株均有b酶活性，所以支配a酶合成的基因位于1号染色体上；A、B株具有c酶活性，所以支配c酶合成的基因位于2号染色体上；C株有d酶活性，所以支配d酶合成的基因位于7号染色体上；A、B、C株均无e酶活性，所以支配e酶合成的基因位于8号染色体上．

解答： 解：（1）人淋巴细胞和鼠骨髓瘤细胞混合培养，只考虑细胞两两融合，有三种融合细胞，即淋巴细胞自身融合形成的细胞、骨髓瘤细胞自身融合形成的细胞、杂交瘤细胞．细胞融合所依据的原理是细胞膜的流动性．
（2）在培养液中加入氨基嘌呤，培养后收集增殖细胞．加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D全合成途径的骨髓细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，淋巴细胞一般不分裂增殖．因此培养液中加入该物质后，不能生长的细胞有①骨髓瘤细胞、②融合的淋巴细胞、④融合的骨髓瘤细胞、⑤淋巴细胞．人淋巴细胞和骨髓癌细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖，因此③杂种细胞能生长．
（3）培养分离出的杂种细胞，培养液中除了有糖、氨基酸、水、无机盐、微量元素、促生长因子外，还必须添加动物血清，同时还应控制好培养液的温度、PH、渗透压、溶解氧等外界环境条件．若出现细胞的接触抑制时，应用胰蛋白酶处理形成单个细胞后分瓶培养．
（4）根据A、B、C株均有b酶活性，再据图可知支配b酶合成的基因位于1号染色体上；根据A、B、C株均无e酶活性，再据图可知支配e酶合成的基因位于8号染色体上；同理可推知，支配a酶合成的基因位于6号染色体上，支配c酶合成的基因位于2号染色体上，支配d酶合成的基因位于7号染色体上．
故答案为：
（1）2          细胞膜的流动性
（2）氨基嘌呤       ①②④⑤加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D全合成途径的骨髓细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，淋巴细胞一般不分裂增殖
人淋巴细胞和骨髓癌细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖
（3）动物血清     PH、渗透压、溶解氧       胰蛋白酶
（4）6、1、2、7、8

点评：本题考查单克隆抗体的制备过程，意在考查考生分析题文和表格提取有效信息和得出正确结论的能力；识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，解决生物学问题的能力．