Question

回答下列有关生物工程的问题．
下表是基因工程中几种限制酶识别序列及其切割位点；图2是转基因香蕉的培育过程，含目的基因的外源DNA和质粒上的箭头表示相关限制酶的酶切位点．

限制酶	BamHI	HindIII	EcoRI	SmaI
识别序列及 切割位点

（1）图1是用限制酶

 

进行切割得到的目的基因，可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化．
（2）从图2中反映质粒作为运载体的特点是

 

（至少写2点）基因工程中还可以用

 

作为运载体．
（3）图2中构建重组质粒不能使用SmaI酶切割的原因是

 

．
（4）图2中④表示组织培养过程中的

 

，这个过程需要的两种植物激素是

 

．
（5）判断该转基因工程是否成功的依据是

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析图1：根据图1中DNA片段两侧的黏性末端可知，左侧是用限制酶BamHI切割形成的，右侧是用限制酶HindⅢ切割形成的．
分析图2：①表示基因表达载体的构建过程；②表示将重组质粒导入农杆菌；③表示采用农杆菌转化法将目的基因导入香蕉组织细胞；④表示脱分化过程；⑤表示再分化过程．

解答： 解：（1）根据图1中DNA片段两侧的黏性末端可知，左侧是用限制酶BamHI切割形成的，右侧是用限制酶HindⅢ切割形成的，这样可以防止含目的基因的外源DNA片段切割后自身环化．
（2）质粒作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来．基因工程中还可以用病毒（噬菌体或动植物病毒）作为运载体．
（3）SmaI酶会破坏目的基因和质粒的标记基因（抗性基因），因此图2中构建重组质粒时不能使用SmaI酶切割．
（4）图2中④表示脱分化过程，这个过程需要的两种植物激素是生长素与细胞分裂素．
（5）判断该转基因工程是否成功的依据是该目的基因在香蕉中是否成功表达．
故答案为：
（1）BamH I和HindⅢ
（2）有多个酶切位点、有标记基因、能在宿主细胞内复制并稳定保存    病毒（噬菌体或动植物病毒） 
（3）SmaI酶会破坏目的基因和质粒的标记基因（抗性基因）
（4）脱分化     生长素与细胞分裂素
（5）该目的基因在香蕉中是否成功表达

点评：本题结合图表，考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的操作工具、操作步骤及相关细节；识记植物组织培养的过程及条件，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题．