Question

2．图为单克隆抗体制备流程示意图．

（1）单克隆抗体制备技术的基础是细胞融合和动物细胞培养．
（2）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基上培养，目的是筛选杂交瘤细胞．在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的种类和数量（浓度），以保证生命活动的正常进行．
（3）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/mL，每孔滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是将产生特定抗体的杂交瘤细胞筛选出来，使得到的抗体纯度更高（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）．
（4）若用¹⁵N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是
核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜．
（5）单克隆抗体的优点是特异性强灵敏度高并且可大量制备．

Answer 1

分析 1、单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体．诱导动物细胞融合的方法有：物理法（离心、振动）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活的病毒）．
2、单克隆抗体的两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群．两次抗体检测：专一抗体检验阳性．

解答 解：（1）动物细胞培养技术是单克隆抗体技术的基础．
（2）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）．在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的种类和浓度，关注培养基的渗透压和营养充沛，以保证生命活动的正常进行．
（3）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/mL，每孔滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是将产生特定抗体的杂交瘤细胞筛选出来，使得到的抗体纯度更高（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）．
（4）用¹⁵N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，单克隆抗体是分泌蛋白质，首先在核糖体中合成，在内质网上初步加工，之后内质网边缘以“出芽”形式冒出囊泡，囊泡离开内质网，转移到高尔基体上，与高尔基体膜融合，囊泡中的物质也进入到高尔基体中，在高尔基体中进一步加工成成熟的蛋白质，高尔基体膜也突起形成小泡，小泡离开高尔基体，转移到细胞膜上，小泡中物质释放到细胞膜外．因此放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜．
（5）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是特异性强，灵敏度高、可大量制备．
故答案为：
（1）细胞融合和动物细胞培养        
（2）筛选杂交瘤细胞　        种类和数量（浓度）
（3）将产生特定抗体的杂交瘤细胞筛选出来，使得到的抗体纯度更高（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）
（4）核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜
（5）特异性强 灵敏度高并且可大量制备

点评 本题考查了单克隆抗体的制备过程以及各细胞器之间的协调配合的相关内容，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力和从题目所给的图形中获取有效信息的能力．