Question

5．埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别．请回答下列问题：
（1）以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但保留有抗原性．为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白，在基因导入牛受体细胞前，基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的（乳腺蛋白基因的）启动子，才能驱动转录过程．这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为乳腺（房）生物反应器．
（2）为了提高胚胎的利用率，可采用胚胎分割技术．进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的囊胚或桑椹胚进行操作．在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割．转基因牛是否培育成功，可以通过抗原-抗体杂交技术技术从分子水平进行检测．
（3）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的B淋巴细胞与鼠的瘤细胞进行融合成杂交瘤细胞，培养后可以获得纯净的单一品种抗体，其特点是特异性强、灵敏度高、并可大量制备，可以用此抗体与药物制成“生物导弹”，抗击EBO．
（4）利用胚胎干细胞可进行治疗性克隆．其主要过程是把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗．则治疗性克隆采用的技术有细胞核移植，早期胚胎培养和干细胞培养．

Answer 1

分析 1、基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．基因表达载体的组成包括：目的基因、启动子、终止子和标记基因等．目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法．检测转基因生物目的基因是否表达--抗原-抗体杂交技术．
2、单克隆抗体的制备流程：人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，通过培养获得的杂交瘤细胞得到单克隆抗体．

解答 解：（1）以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全，其原因是GP蛋白自身没有感染能力，但保留有抗原性．为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白，在基因导入牛受体细胞前，基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的（乳腺蛋白基因的）启动子，才能驱动转录过程．这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为乳腺（房）生物反应器．
（2）进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的囊胚或桑椹胚进行操作．在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．转基因牛是否培育成功，可以通过抗原-抗体杂交技术从分子水平进行检测．
（3）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的B淋巴（效应B或浆）细胞与鼠的瘤细胞进行杂交，筛选后进一歩培养的是杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能产生单一抗体，又能在体外快速增殖．可以用杂交瘤细胞产生的抗体与药物制成“生物导弹”，抗击埃博拉病毒．
（4）治疗性克隆的主要过程是把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎，体外培养到一定时期分离出ES细胞，获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞（如神经细胞、肌肉细胞和血细胞），用于治疗．由此可见，治疗性克隆采用的技术有细胞核移植，早期胚胎培养和干细胞培养．
故答案为：
（1）抗原性     （乳腺蛋白基因的）启动子       乳腺（房）生物反应器
（2）桑椹胚       内细胞团均等分割      抗原-抗体杂交技术
（3）B淋巴细胞        特异性强、灵敏度高、并可大量制备
（4）细胞核移植     早期胚胎培养

点评 本题考查基因工程和细胞工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具、操作步骤，掌握各步骤的相关细节；识记单克隆抗体的制备过程，能结合所学知识和题中信息准确答题，综合性较强，有一定难度．