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    6．自然界中的两种微生物，可以通过各自不同的作用将培养液中的葡萄糖转化为维生素C，其过程如图所示．在欧文氏菌中无2，5-DKG还原酶基因，不能将2，5-DKG转化为2-KLG．科学家通过基因工程技术，改造欧文氏菌，使其可产生2-KLG．请回答下列问题．

    （1）改造欧文氏菌的过程中，目的基因为2，5-DKG还原酶基因．将棒状杆菌的DNA全部提取出来，用适当的限制性核酸内切酶将其切成DNA片段，并导入受体菌的群体中，构成基因组文库．
    （2）按其来源不同，改造过程中所使用的DNA连接酶有两类，即T4DNA连接酶和E．coliE．coliE．coliDNA连接酶．
    （3）利用基因工程技术改造此细菌的基本方法是：先用限制酶切割目的基因和载体，然后用DNA连接酶将上述切割产物连接，构成重组DNA分子并将其导入受体菌中．
    （4）一般情况下，不能直接用未处理的此菌作为受体菌，原因是未处理的此菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱．

    分析 1、基因工程的工具：
    （1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂．
    （2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键．
    （3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．
    2、基因工程技术的基本步骤：
    （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
    （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
    （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

    解答 解：（1）由图可知，改造欧文氏菌的过程中，目的基因为2，5-DKG还原酶基因；该基因文库含有棒状杆菌的全部DNA，属于基因组文件．
    （2）按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即EcoliDNA连接酶和T4DNA连接酶．
    （3）利用基因工程技术改造此细菌的基本方法是：先用同种限制性核酸内切酶同时切割目的基因（2，5-DKG还原酶基因）和运载体，然后用DNA连接酶将上述切割产物连接，构成重组DNA分子，并将其导入到受体菌中．
    （4）未处理的此菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱，因此一般情况下，不能直接用未处理的此菌作为受体菌．
    故答案为；
    （1）2，5-DKG还原酶基因  基因组
    （2）Ecoli　T4  
    （3）限制酶      载体     重组质粒（重组DNA）  
    （4）未处理的此菌吸收质粒（外源DNA）的能力极弱

    点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各操作步骤中的细节，能结合图中信息和所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．

    练习册系列答案
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    16．下列有关生物体内水的叙述，不正确的是（　　）
    A．越冬植物体内自由水与结合水的比值下降
    B．细胞中自由水含量降低是细胞衰老的特征之一
    C．蛋白质合成过程中伴随着水的生成
    D．水是占细胞鲜重中含量最多的有机物

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    17．通过对胎儿或新生儿的体细胞进行显微镜观察，难以发现的遗传病是（　　）
    A．XO型（特纳氏综合征）B．唇裂
    C．猫叫综合征D．镰刀型细胞贫血症

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    14．中国水仙是传统观赏花卉，由于其高度不育，只能进行无性繁殖，因而品种稀少．为了探究中国水仙只开花不结实的原因，有研究者开展了染色体核型分析实验，先制作了临时装片进行镜检、拍照，再对照片中的染色体进行计数、归类、排列，主要步骤如图1：

    请回答下列问题：
    （1）选取新生根尖作为实验材料的主要原因是_新生根尖分生区分裂旺盛．
    （2）实验过程中用1mol•L-1HCl 解离的目的是使组织细胞相互分离．
    （3）该实验采用卡宝品红作为染色剂，与卡宝品红具有相似作用的试剂有②③ （填序号）．
    ①双缩脲试剂   ②醋酸洋红液   ③龙胆紫溶液   ④秋水仙素溶液
    （4）镜检时，应不断移动装片，以寻找处于中期的细胞进行拍照．
    （5）由图2核型分析结果，得出推论：中国水仙只开花不结实的原因是中国水仙是三倍体，减数分裂时同源染色体联会紊乱，不能产生生殖细胞．
    （6）为了进一步验证上述推论，可以优先选用④ （填序号）作为实验材料进行显微观察．
    ①花萼  ②花瓣   ③雌蕊  ④花药  ⑤花芽．

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    B．浓度为0.1mg/L时的两次实验数据偏差较大，应重做浓度为0.1mg/L的促生长实验
    C．切段在蒸馏水中浸泡1h的目的是排除内源激素的影响
    D．幼嫩的芽、叶和发育中的种子可合成NAA

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    11．如图为人工种子培养过程流程图解，下列相关的叙述中，不正确的是（　　）
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