Question

[生物--选修3：现代生物科技专题]
请根据以下资料回答问题：
（l）我国生物学家运用现代生物技术培育出了转基因绒山羊，其过程如图1所示；

①该基因工程的核心步骤是将

 

基因与载体重组构建基因表达载体．
②若使用的载休质粒是双链闭合环状的DNA分子，用两种识别序列不同的限制酶M和N切割如图2，通过凝胶电泳分离分析得下表；

使用限制酶	酶切结果（单位：kb）
酶M	1.0、5.0、10.0
酶M+酶N	1.0、2.0、3.0、4.0、5.0

则在该质粒中，M酶与N酶的切割位点分别有

 

个和

 

个．分别由M酶与N酶切出的能相互粘连的末端在酶的作用下相互连接，连接后的序列

 

（填“能”或“不能”）用M酶、N酶进行切割．
③胚胎于细胞（ES）可由囊胚的

 

分离培养获得，经扩大培养诱导分化为早期胚胎，随后即可植入经

 

处理的代孕母羊体内，
（2）某H蛋白是一种抗原蛋白，该蛋白也是一种跨膜蛋白，其结构如图3所示（抗原特性由胞外区决定）：
①制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建

 

区基因，转入原核细胞表达并提纯．
②B淋巴细胞成熟于

 

（填“器官名称”）中．若要制备抗H蛋白单克隆抗体，所培养的杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和接受过

 

 刺激的B淋巴细胞的融合而成的．
（3）上述转基因细胞系的形成以及杂交瘤细胞的培养所采用的现代生物技术手殷是

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,胚胎干细胞的来源及分化

专题：

分析：分析图1：图1培育出转基因绒山羊采用了基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关技术．
分析图2：酶M和酶N的识别序列不同，但两者切割后形成的黏性末端相同，即两者的末端可相互连接．
分析表格：质粒是环状DNA分子，酶M将质粒切割成三个DNA分子片段，所以酶M的切割位点有3个．酶M和酶N共切割成5个片段，所以酶N的切割位点是2个．

解答： 解：（1）①由图可知，目的基因是IGF-1，而基因工程的核心步骤就是将目的基因（IGF-1）与载体重组构建基因表达载体．
②由以上分析可知，M酶的切割位点是3个，M酶的切割位点是2个．由图可知，M酶与N酶切出的能相互粘连的末端在酶的作用下相互连接形成或，连接后的碱基序列与酶M或酶N的切割位点都不相同，因此不能M酶或N酶切割．
③胚胎干细胞可由囊胚的内细胞团分离培养获得，经扩大培养诱导分化为早期胚胎，随后即可植入经同期发情处理的代孕母羊体内．
（2）①H蛋白是一种抗原蛋白，也是一种跨膜蛋白，且抗原特性由胞外区决定，因此制备免疫小鼠用的H蛋白（抗原）时，应构建胞外区基因，转入原核细胞表达并提纯．
②B淋巴细胞成熟于骨髓中．若要制备抗H蛋白单克隆抗体，所培养的杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和接受过H蛋白刺激的B淋巴细胞的融合而成的．
（3）上述转基因细胞系的形成以及杂交瘤细胞的培养所采用的现代生物技术手殷是动物细胞培养．
故答案为：
（1）①IGF-1    ②3    2    不能    ③内细胞团   同期发情
（2）①胞外    ②骨髓     H蛋白
（3）动物细胞培养

点评：本题结合图表，考查基因工程、细胞工程和胚胎工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能结合图中和表现信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．