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    13．生物学家通过转基因体细胞克隆技术获得转基因牛，以便通过乳房生物反应器生产人的血清蛋白．请回答下列问题：
    （1）请完善主要步骤：从人的基因组文库获得目的基因；构建含目的基因的表达载体；然后把基因表达载体导入牛的受精卵，目前最有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法是显微注射技术．
    （2）目的基因的检测与鉴定分三个层次．若要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因及目的基因是否转录出了mRNA，检测方法是DNA分子杂交，若要检测目的基因是否翻译成蛋白质，检测方法是抗原-抗体杂交．

    分析 1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．
    2、目的基因的检测与鉴定：
    （1）分子水平上的检测  
      ①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术
      ②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术
      ③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术
    （2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
    （例：用虫食用棉花，观察其存活情况，来鉴定棉花是否具有抗虫特性．）

    解答 解：（1）基因工程的操作步骤：从人的基因组文库中获取目的基因；目的基因与载体结合构建基因表达载体，基因表达载体包括目的基因、标记基因、启动子、终止子；然后通过显微注射技术，把基因表达载体导入牛的受精卵．
    （2）目的基因的检测与鉴定分三个层次．若要检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因及目的基因是否转录出了mRNA，检测方法是DNA分子杂交，若要检测目的基因是否翻译成蛋白质，检测方法是抗原-抗体杂交．
    故答案为：
    （1）基因组文库    显微注射技术
    （2）DNA分子杂交   抗原-抗体杂交

    点评 本题考查了基因工程操作步骤的相关知识，考生要能够识记基因表达载体的组成；识记动物基因工程一般用受精卵作为受体细胞；识记目的基因检测和鉴定的方法等．

    练习册系列答案
    年级 高中课程 年级 初中课程
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    科目：高中生物 来源：2015-2016学年河北武邑中学高二下期末考试生物试卷（解析版） 题型：选择题

    赤霉素具有促进植物茎杆伸长的作用，其作用机理如下图所示。遗传学研究表明，赤霉素对矮生玉米的作用效果明显，而对正常株高玉米的作用效果不明显。下列分析不合理的是（ ）

    A．图中的a过程表示促进，b过程表示抑制

    B．图中的c过程可能是促进，也可能是抑制

    C．赤霉素缺乏的植物体无法完成生长素的合成

    D．控制玉米茎秆高度的基因可能与赤霉素的合成代谢有关

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    4．有关下列细胞器的叙述，正确的一组是（　　）
    （1）线粒体（2）叶绿体（3）高尔基体（4）核糖体（5）内质网（6）中心体
    ①进行光合作用的细胞一定有（2）
    ②进行有氧呼吸的细胞一定有（1）
    ③含有单层膜的细胞器有（3）、（5）
    ④含RNA的细胞器有（1）、（2）、（4）
    ⑤能进行有丝分裂的细胞一定有（1）、（6）
    ⑥能进行蛋白质合成的细胞一定有（1）、（5）
    ⑦上述所有细胞器都含有蛋白质．
    A．①②③B．③④⑦C．④⑤⑥D．⑤⑥⑦

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    1．如图为某家族甲、乙两种遗传病的系谱图．甲遗传病由一对等位基因（A，a）控制，乙遗传病由另一对等位基因（B，b）控制，这两对等位基因独立遗传．已知Ⅲ-4携带甲遗传病的致病基因，但不携带乙遗传病的致病基因．经过大规模的遗传调查已知，甲病在人群中患病率为$\frac{1}{100}$，乙病在男性中的男患者为8%．回答问题：
    （1）Ⅲ-1与一个表现正常女性婚配后，其子女患甲病的概率为$\frac{1}{33}$．
    （2）理论上女性中的乙病女患者和携带者依次分别所占的百分比是0.64%；14.72%．[计算出准确答案，不要舍弃小数点后数字，也可以只列准确的算式，数据必需有据]
    （3）Ⅳ-1的这两对等位基因均为杂合的概率是$\frac{3}{10}$．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    8．下来属于中群数量特征的描述是（　　）
    A．校园草地中杂草有20多种B．土壤中东亚飞蝗卵有26个/m2
    C．某块稻田中水稻均匀分布D．七星瓢虫在树干上集群分布

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    18．融合蛋白是通过DNA重组技术将两个或多个基因的编码区首尾连接，由同一调控序列控制合成的蛋白质．人的表皮生长因子受体（EGFR）是影响癌症发生发展的重要因素，它在肺癌、脑肿瘤等实体瘤中均有大量表达．天花粉蛋白（TCS）是重要天花粉的有效成分，具有抗肿瘤作用．下图是通过基因工程方法将人表皮生长因子基因（EGF）和TCS基因连接起来，利用大肠杆菌生成人表皮生长因子-天花粉蛋白融合蛋白的过程示意图．请回答：

    （1）为了建立含有EGF的cDNA文库，应从健康人体的表皮细胞中提取总mRNA，通过反（逆）转录法合成cDNA．从cDNA文库中提取的EGF的长度比从基因组文库中提取的EGF短．利用PCR技术可以大量扩增EGF，该技术所利用的原理是DNA双链复制．
    （2）在①过程中，应使用的限制酶是BamHⅠ和SphⅠ，在融合蛋白基因的首端还应
    插入启动子，它是RNA聚合酶识别和结合的位点．
    （3）在②过程中，首先用Ca2+处理大肠杆菌，使其转变为感受态细胞．
    （4）应用抗原--抗体杂交_技术可检测大肠杆菌是否表达出融合蛋白．
    （5）单纯使用天花粉蛋白治疗癌症疗效甚微，而人表皮生长因子--天花粉蛋白融合蛋白疗效显著，其原因是人表皮生长因子能与肿瘤细胞表面的受体（EGFR）特异性结合，从而使天花粉蛋白定向的作用于肿瘤细胞．
    （6）某同学为了筛选插入目的基因的表达载体，将处理过的载体分别置于含有氨苄青霉素和四环素的培养基上培养，观察其增殖和表达情况．此设计方案是否合理，不合理请说明理由表达载体不能在培养基上增殖和表达，只有导入大肠杆菌，才能增殖和表达．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    5．关于生态系统的描述，正确的是（　　）
    A．生态系统中生物多样性的形成也就是新的物种不断形成的过程
    B．能量沿着食物链传递，传递效率随营养级的升高而逐级递减
    C．任何生态系统都需要不断得到来自系统外的能量补充
    D．生态系统生物细胞呼吸过程中，化学能大部分转变成为热能少部分转变成ATP

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    20．如图表示叶片光合速率与叶肉细胞间隙中CO2浓度的关系，下列有关叙述错误的是（　　）
    A．BC段的斜率与叶绿体内固定CO2的酶活性呈正相关
    B．温室效应一定程度上能提植物光合速率
    C．当CO2浓度低于b时，植物不进行光合作用
    D．当CO2浓度高于s时，Pm值主要受光反应速率的限制

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    20．注射疫苗通常可以预防某种疾病的发生，在疫苗注射后的有效期内，当相应的抗原再次入侵机体时，机体会快速产生大量的抗体，产生这些抗体的细胞直接来源于（　　）
    A．浆细胞的分裂B．记忆细胞的分裂分化
    C．造血干细胞的分裂分化D．T细胞的分裂分化

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