Question

2．为了获得β-胡萝卜素产品（β-胡萝卜素较耐酸），某小组开展了产β-胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验．请回答下列问题：
（1）实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是干热灭菌和湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）；为了减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该用牛皮纸包扎器皿．
（2）为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，此培养基从功能上分类属于培养基，添加青霉素目的是抑制细菌（放线菌）生长．
（3）图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、乙、丙指示的依次是．①（填序号）
①安全阀、放气阀、压力表②放气阀、安全阀、压力表
③安全阀、放气阀、温度表④放气阀、安全阀、温度表
（4）为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是接种环温度过高，菌被杀死．
（5）为增加β-胡萝卜素提取量，在研磨酵母细胞时，添加石英砂的目的是有助于研磨充分；研磨时不需要（填“需要”或“不需要”）添加CaCO₃，理由是β-胡萝卜素较耐酸
（6）下列材料或用具：①培养细菌用的培养基与培养皿，②玻棒、试管、锥形瓶和吸管，③实验操作者的双手．其中需要灭菌的是：①②（填序号）；需要消毒的是：③（填序号）．
（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉．

Answer 1

分析 1、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
2、消毒和灭菌

	消毒	灭菌
概念	使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法	灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
适用对象	操作空间、某些液体、双手等	接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等

解答 解：（1）灭菌常用方法有高压蒸汽灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌等，培养皿常用高压蒸汽灭菌、干热灭菌．将培养皿放入灭菌锅之前通常用牛皮纸或报纸包扎避免灭菌后的再次污染．
（2）青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌的繁殖期起杀菌作用，因此添加青霉素可抑制细菌的生长．
（3）乙连接软管为排（放）气阀，甲为安全阀，丙是压力表．
（4）三块平板有两块平板长有菌落，说明含有菌株并可在培养基上生长；而其中一块未见菌落，说明菌株死亡．因此，应在接种过程中接种环灼烧后未冷却或未足够冷却，使菌株因温度过高被杀死．
（5）石英砂有助于研磨充分．CaCO₃用于中和酸性物质，β-胡萝卜素较耐酸，因此不需添加．
（6）在实验中，①培养细菌用的培养基与培养皿和②玻棒、试管、锥形瓶和吸管需要灭菌，③实验操作者的双手需要消毒．
（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉．
故答案为：
（1）干热灭菌和湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）       用牛皮纸包扎器皿
（2）抑制细菌（放线菌）生长  
（3）①
（4）接种环温度过高，菌被杀死
（5）有助于研磨充分      不需要       β-胡萝卜素较耐酸
（6）①②；③
（7）灭菌

点评 本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记无菌技术；试剂接种微生物常用的两种方法，能结合所学的知识准确答题．