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    经转基因的大肠杆菌某品系能够合成干扰素，一制药厂引进该品系菌株后对其培养研究。在特定的培养基中，接种少量菌种后，定期取样测定菌体密度和培养基的pH，并作记录。由于一时疏忽未按顺序填写记录单，记录如下表，请给出正确的分析


    1. A.
      可以通过样品菌体密度的大小调整记录顺序
    2. B.
      可以通过样品pH值的大小调整记录顺序
    3. C.
      样品培养基pH为6.72，菌体密度为4.9×103万个/mL时，处于细菌生长的稳定期
    4. D.
      样品培养基pH为6.37，菌体密度为2.0×104万个/mL时，处于细菌生长的对数期
    B
    微生物生长曲线先升后降，单凭菌体密度无法调整记录顺序。培养液中pH呈下降趋势，故可通过样品pH值的大小调整记录顺序。C项样品菌体离数目最大还有一定距离，为对数期。5号样品数目最多为稳定期，D项样品pH小于5号，故其取样应在5号样品之后，不可能是对数期。
    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    经转基因的大肠杆菌某品系能够合成干扰素，一制药厂引进该品系菌株后对其培养研究。在特定的培养基中，接种少量菌种后，定期取样测定菌体密度和培养基的pH，并作记录。由于一时疏忽未按顺序填写记录单，记录如下表，请给出正确的分析（）

    样品

    1

    2

    3

    4

    5

    6

    7

    8

    9

    10

    菌体密度

    万个/mL

    0.17

    4.9×103

    1.8×102

    2.0×104

    2.2×104

    0.05

    1.4×103

    0.037

    2.1×104

    1.6

    pH

    7.47

    6.72

    7.14

    6.37

    6.43

    7.49

    5.82

    7.50

    6.56

    7.36

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    科目：高中生物 来源：2013届江苏省扬州中学高三最后一次模拟考试生物试卷（带解析） 题型：综合题

    回答下列关于基因工程的问题。
    草甘膦是一种广谱除草剂，其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成，最终导致植物死亡。但是，它的使用有时也会影响到植物的正常生长。目前，已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因，若将该基因转入植物细胞内，从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。
    下图A-F表示6株植物，其中，植物A和D对草甘膦敏感，B和E对草甘膦天然具有抗性，C和F则经过了转基因处理，但是是否成功还未知。图1和2分别表示两段DNA序列。表格中1-4分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点。据图回答下列问题：
    .


    （1）若A-C浇清水，D-F浇的水中含有草甘膦，上述植物中，肯定能健康成长的是_________。
    （2）若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲，在大肠杆菌培养基中还必须加入 ___________。
    （3）假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图I所示，则应选择表中酶__________进行酶切；若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图I和II所示，则应选择表中酶__________ 进行酶切。
    （4）假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图II所示，请在方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列。（2分）

    （5）假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中，但植物F仍没有表现出抗性，分析可能的原因_______________________________________________________________。
    下图甲是某目的基因（4.0kb，1kb=1000对碱基）与大肠杆菌pUC18质粒（2.7kb）重组的示意图。图中Ap′是抗氨苄青霉素基因，lacZ是显色基因，其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧，其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色。（图乙中深色圆点即为蓝色菌落）

    （6）图乙的培养基中含有氨苄青霉素，请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中，何种会含有重组质粒。___________。
    （7）现用EcoRI酶切质粒，酶切后进行电泳观察，若出现长度为_________kb和      kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功。（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽略不计）

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    科目：高中生物 来源：2013届海南省琼海市嘉积中学高三下学期第一次月考生物试卷（带解析） 题型：综合题

    （1）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图所示。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：

    ①上述制备该新型降钙素，运用的现代生物工程技术是               。
    ②Klenow酶是一种           酶，合成的双链DNA有           个碱基对。
    ③获得的双链DNA经EcoRⅠ（识别序列和切割位点-G↓AATTC-）和BamHⅠ（识别序列和切割位点-G↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
    A:设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是                                             。
    B:要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有           。
    ④经DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是                                            。
    (2)科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图所示)，请结合图示回答下列问题。

    ①在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离，形成单个细胞，这个过程中需要利用________酶处理。
    ②形成重组细胞时应选用________期的卵母细胞，并去掉其细胞核的原因是____________
    __________________________________。
    ③如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，会表现出_______和________等特点。
    ④在胚胎移植技术的基本程序中，冲卵以后，要对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应该发育到         或者囊胚阶段。
    ⑤上图中所示的生物技术包括有核移植、________、________等。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物________具有全能性。

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    科目：高中生物 来源：2012-2013学年山东省高三（6月）第二次模拟考试理科综合生物试卷 题型：综合题

    降钙素是一种多肽类 激素，临床上用于治疗骨质疏松症等疾病。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条各72个碱基的DNA单链，两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段，再利用Klenow酶补平，获得双链DNA，过程如下图。

    在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：

    (1)Klenow酶是一种_________酶，获取新型降钙素目的基因的方法是______________________。

    (2)获得的双链DNA经EcoR I（识别序列和切割位点．-G↓LAATTC-）和BamH I（识别序列和切割位点．-G↓GATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。

     ①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它___________。若选择动物乳房反应器生产新型降钙素，则应将重组DNA导入__________细胞，成功后利用胚胎工程，先进行早期胚胎培养，最后通过______________，即可获得转基因动物。

     ②设计EcoR I和BamH I双酶切的目的是__________________________。

     ③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有 __________________________________。

    (3)制备该新型降钙素，运用的是现代生物工程技术中的_________________工程。

     

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