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     下列不是基因工程中经常用来运载目的基因运载体的是

       A.细菌质粒　　　　B.噬菌体　　　C.动植物病毒　　　D.酵母菌核内的DNA

    D  

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    科目：高中生物 来源：上海市十三校2012届高三第二次联考生物试题 题型：071

    回答下列关于基因工程的相关问题。

    质粒是基因工程中的一种常用的工具之一，经修饰改造后的质粒如下图七一1所示。PUC118上的Lacz基因编码β半乳糖苷酶的一条多肽链，其表达产物与菌落颜色有关；经“修饰”后的“多克隆位点”位于LacZ基因之中。AmpR是抗氮卞青霉素基因。

    1．PUC118上的基因AmpR作用的是：________“多克隆位点”中含有多种限制酶的识别序列，如HindⅢ，其切割后产生的DNA片断中含有的部分序列是，则限制酶HindⅢ的识别序列是________。

    2．图2示意将目的基因导入大肠杆菌的操作步骤。其中，I～V表示操作过程；A－F表示使用的相关工其，其中的E1和E2表示有关的酶。试问：E2应是________（酶）；经过E2的切割，供体染色体中的DNA片段中游离的磷酸基团总数的变化是：________。

    在策略上，图1中的“多克隆位点”包含了多种、多个识别序列，请说出设计这种“多克隆位点”的目的：________。

    3．LacZ基因可以使细菌在含有X－gttl（5－溴－4－氯－3－吲哚－B－D－半乳糖）底物和IPTG（一种乳糖类似物）的培养基上形成蓝色的菌落，即X－gal被lacZ基因编码产生的鼻半乳糖昔酶水解成蓝色；若要形成重组质粒，则在含X－gal的培养基上将形成白色菌落（而不是蓝色的）。

    请据图2分析下列问题：

    ①用本无PUC118的大肠杆菌作为受体细胞，将培养瓶C中被连接处理后的DNA混合物倾入含X－gal、IPTG和________的D培养基平板上，其目的是________。

    菌落生长结果图2中所示。

    ②过程V进行转移培养，则该应该挑选X、Y、Z中的________菌落进行液体培养。形成该颜色的生理原因是________。如此目的基因便被克隆了！

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    科目：高中生物 来源：2012-2013学年河北省石家庄市第一中学高二下学期期中考试生物试卷（带解析） 题型：单选题

    下列关于育种工程的叙述中，错误的是

    A．不同种的植物体细胞杂交，能产生新的植物体，这是传统的有性杂交方式所不具备的
    B．能够使植物体表达动物蛋白的育种方法是基因工程育种
    C．经细胞核移植培育出的新个体只有一个亲本的遗传性状
    D．单倍体育种过程中应用了植物组织培养技术

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    科目：高中生物 来源：2013-2014学年北京市高三第一学期期中测试生物卷（解析版） 题型：综合题

    14分）、某质粒上有SalI、HindⅢ、BamHI三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示，请回答下列问题。

    (1)将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状(变异性状)的来源属于______                          。

    (2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下，烟草不会具有抗盐特性，原因是抗盐基因在烟草细胞中不能复制，也不能______                    。

    (3)在构建重组质粒时,应选用______       和_____        _两种酶对______           和_____               _进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性。

    (4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。

    培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有______       、_____             _。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是______       菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的______           作探针进行分子杂交检测，又要用一定浓度的盐水浇灌烟草植株从        水平鉴定烟草植株的耐盐性。

    (5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_______          技术，愈伤组织经______               进而形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加                      。

     

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    科目：高中生物 来源：2014届河北省石家庄市高二下学期期中考试生物试卷（解析版） 题型：选择题

    下列关于育种工程的叙述中，错误的是

    A．不同种的植物体细胞杂交，能产生新的植物体，这是传统的有性杂交方式所不具备的

    B．能够使植物体表达动物蛋白的育种方法是基因工程育种

    C．经细胞核移植培育出的新个体只有一个亲本的遗传性状

    D．单倍体育种过程中应用了植物组织培养技术

     

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    科目：高中生物 来源：2010年上海市虹口区高三第二次模拟考试生物试题 题型：综合题

    （8分）下图（一）为某基因工程中利用的质粒简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRI、BamHI的酶切位点，ampR为青霉素（抗生素）抗性基因，tctR为四环素（抗生素）抗性基因。已知目的基因的两端分别有包括EcoRI、BamHI在内的多种酶的酶切位点。下图（二）为几种酶作用于基因的位置。请回答下列问题：

    （1）在基因工程中常用的工具有三种：一是用作切取目的基因的              酶；二是将目的基因与运载体拼接的               酶；三是作为运载体的质粒。

    （2）将含有目的基因的DNA与经特定的酶切后的运载体（质粒）进行拼接形成重组DNA，理论上讲，重组DNA可能有：目的基因－目的基因、目的基因－运载体和运载体－运载体三种，其中有效的（所需要的）重组DNA是                  ，因此需要对这些拼接产物进行分离提纯。

    （3）利用图（一）所示的质粒拼接形成的3种拼接产物（重组DNA）导入无任何抗药性的原核宿主细胞，并接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的拼接产物（重组DNA）是                。含有效的重组基因（目的基因-运载体）的原核宿主细胞在含青霉素的培养基上_________（能/不能）生长。

    （4）在动物基因工程中，将重组DNA导入受体细胞的常用方法是          。

    （5）图（二）中，作用于a 位置的酶是               ；作用于b 位置的酶是                  。

     

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