下图是转基因抗盐烟草的培育过程．请分析回答下列问题:(1)①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增.该技术须用酶.所需的原料是．(2)已知几种限制酶识别序列及其切割位点:用图中的质粒和目的基因构建重组DNA分子.不能使用SmaⅠ酶切割.原因是．图中②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化.应选用酶对外源DNA.质粒进行切� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

精英家教网 > 高中生物 > 题目详情

下图是转基因抗盐烟草的培育过程．请分析回答下列问题：

（1）①过程获得的抗盐基因可用PCR技术进行扩增，该技术须用

酶，所需的原料是

．
（2）已知几种限制酶识别序列及其切割位点（如下表）：

用图中的质粒和目的基因构建重组DNA分子，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是

．
图中②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用

酶对外源DNA、质粒进行切割．
（3）图中④过程为筛选出导入了重组DNA分子的农杆菌，应在培养基中加

．
（4）为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的

作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是

．

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：分析题图：图示是转基因抗盐烟草的培育过程，其中①表示含有目的基因的外源DNA分子；②表示DNA分子；③表示基因表达载体的构建过程；④表示采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞；⑤表示脱分化过程；⑥表示再分化过程．

解答： 解：（1）用PCR技术扩增目的基因的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）．
（2）由图可知，使用SmaI酶切割，将会破坏质粒的抗性基因（标记基因），同时也会破坏目的基因片段，因此用图中的质粒和目的基因构建重组DNA分子时，不能使用SmaⅠ酶切割．标记基因和外源DNA目的基因中均含有EcoRⅠ酶切位点，用该酶切割，再在DNA连接酶的作用下，可形成3种环状产物，即外源DNA自身连接、质粒自身连接、外源DNA和质粒连接，因此为了防止目的基因的外源DNA片段和质粒自身环化，应选用BamhHI和HindⅢ酶对外源DNA和质粒进行切割，这样使目的基因两端的黏性末端不同，可以防止自身环化．
（3）由图可知，标记基因是M抗生素抗性基因，因此图中④过程为筛选出导入了重组DNA分子的农杆菌，应在培养基中加M抗生素．
（4）为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的目的基因作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，即用虫子感染转基因香蕉，观察是否抗虫．
故答案为：
（1）热稳定DNA聚合酶     脱氧核苷酸
（2）使用SmaI酶切割，将会破坏质粒的抗性基因（标记基因），同时也会破坏目的基因片段    BamhHI和HindⅢ酶
（3）M抗生素
（4）目的基因     用虫子感染转基因香蕉，观察是否抗虫

点评：本题结合图解，考查基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中的相关细节，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．

练习册系列答案

年级	高中课程	年级	初中课程
高一	高一免费课程推荐！	初一	初一免费课程推荐！
高二	高二免费课程推荐！	初二	初二免费课程推荐！
高三	高三免费课程推荐！	初三	初三免费课程推荐！
更多初中、高中辅导课程推荐,点击进入>>