Question

14．废纸主要成分是木质纤维．图1是工业上利用废纸生产乙醇的基本工作流程．回答下列问题：

（1）自然界中①环节需要的微生物大多分布在富含纤维素（或落叶较多）的环境中．②中获得的酶是纤维素酶．
（2）若从土壤中分离出上述微生物，应以纤维素为唯一碳源的培养基进行培养，并加入形成红色复合物进行筛选，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的透明圈．
（3）要统计每克土壤样品中上述微生物活菌数目，宜采用法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大约推测出样品中活菌数．
（4）接种前要对培养基进行．在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行．
（5）接种后一个平板经培养后的菌落分布如图2所示，推测接种时可能的操作失误是涂布不均匀．向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净的原因是避免培养基污染棉塞．
（6）生产中可以满足④环节的常见菌种是酵母菌．玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可为该微生物的生长提供碳源．

Answer 1

分析 1、分析题图：①表示纤维素分解菌的筛选，②表示纤维素酶的活性鉴定，③表示纤维素发酵，④表示接种微生物，⑤表示酒精发酵．X表示酵母菌．
2、土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶．纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长．在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌．

解答 解：（1）富含纤维素的环境中纤维素分解菌较多；②中获得的酶是纤维素酶，该酶是一种复合酶，包括C_l酶、C_x酶、葡萄糖苷酶．
（2）筛选纤维素分解菌时用以纤维素作为唯一碳源的选择培养基；在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌．
（3）要统计每克土壤样品中上述微生物活菌数目，宜采用稀释涂布平板法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大约推测出样品中活菌数．
（4）接种前要对培养基进行灭菌．在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行．
（5）纯化菌种时，为了得到单一菌落，常采用的接种方法有两种，即平板划线法和稀释涂布平板法，图中采用的是稀释涂布平板法，但菌落分布不均，其原因是涂布不均匀．向试管内分装含琼脂的培养基时，若试管口粘附有培养基，需要用酒精棉球擦净，这样可以避免培养基污染棉塞．
（6）参与酒精发酵的常见菌种是酵母菌；玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可为该微生物的生长提供碳源．
故答案为：
（1）富含纤维素（或落叶较多）纤维素
（2）纤维素刚果红（CR）透明圈
（3）稀释涂布平板法菌落数
（4）灭菌无菌
（5）涂布不均匀    避免培养基污染棉塞
（6）酵母菌    碳源

点评 本题结合图解，考查微生物的分离和培养，要求考生识记纤维素分解菌的筛选与分离的相关知识，意在强化学生对相关实验操作的理解与运用．