Question

【题目】马铃薯块茎含有大量的淀粉，富含多种维生素和无机盐，我国已将马铃薯作为主粮产品进行产业化开发。下图是转基因抗盐马铃薯的培育过程，请分析回答问题：

（1）为获取抗盐基因，可以从碱蓬细胞研磨液中提取抗盐基因的 来合成cDNA。

（2）上图构建基因表达载体时，最好选用 酶切割含目的基因的外源DNA和质粒，以防止目的基因、质粒自身环化，但不能使用Sma l切割的原因是 。构建好的重组质粒在抗盐基因前要加上特殊的启动子，启动子是一段有特殊序列的 片段。

（3）将基因表达载体导入农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA上的原因是 。通过农杆菌的转化作用，使抗盐基因插入到马铃薯细胞中的染色体DNA上，从而使抗盐基因的遗传特性得以 。

（4）上图转基因抗盐马铃薯培育过程中，属于脱分化阶段的是 （填序号）。从个体生物学水平上检验转基因抗盐马铃薯是否培育成功的方法是 。

Answer 1

【答案】（1）mRNA（1分） （2）EcoRⅠ和HindⅢ SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因 DNA （3）T-DNA是可以转移的DNA 稳定维持和表达 （4）⑤ 将转基因马铃薯幼苗栽种在盐碱地或较高浓度盐溶液中，观察是否能正常生长

【解析】（1）cDNA是逆转录合成的DNA片段，需要从供体细胞中提取目的基因转录的mRNA为模板。（2）在构建基因表达载体过程中，选择限制酶的原则是不能破坏目的基因和质粒上的标记基因且能将目的基因两端以及质粒同时切割开来，所以可以选择EcoRⅠ和HindⅢ，不能使用Sma l切割的原因是SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因。构建好的重组质粒在抗盐基因前要加上特殊的启动子，启动子是一段有特殊序列的DNA片段。（3）将基因表达载体导入农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA上的原因是T-DNA是可以转移的DNA。通过转化作用，使抗盐基因插入到马铃薯细胞中的染色体DNA上，从而使抗盐基因的遗传特性得以稳定维持和表达。（4）上图转基因抗盐马铃薯培育过程中，⑤是脱分化阶段，⑥是再分化阶段。从个体生物学水平上检验转基因抗盐马铃薯是否培育成功的方法是将转基因马铃薯幼苗栽种在盐碱地或较高浓度盐溶液中，观察是否能正常生长。