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【题目】如图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答:

(1)能否利用人的皮肤细胞来完成①过程?________为什么?__________

(2)过程②必需的酶是________酶,过程③在体外需要的条件是________,过程④在体外必需的酶是________酶,上图用________(方法)来获得目的基因。

(3)在利用A、B获得C的过程中,必须用________________切割A和B,使它们产生________________,再加入________,才可形成C。

(4)C的组成除必须含有________________、复制原点外,还必须有________________

(5)图中的D是基因工程中的受体细胞,为了使过程⑧更易进行,可________处理D。

【答案】不能由于基因选择性表达,人的皮肤细胞胰岛素基因不能表达得到胰岛素逆转录加热热稳定DNA聚合(Taq)反转录法同一种限制酶相同的黏性末端DNA连接酶目的基因标记基因启动子终止子Ca2+

【解析】

考查利用反转录法合成目的基因及利用基因工程技术生产基因产物的的基本操作程序,旨在考查系统掌握基因工程技术的情况。

(1) 不能从皮肤细胞中获得胰岛素基因的mRNA,是因为基因选择性表达,人的皮肤细胞胰岛素基因不表达。

(2)过程②是逆转录,必需的酶是逆转录酶。过程③是解旋,在体外需要的条件是加热。过程④是以DNA一条链为模板合成子代DNA,在体外必需的酶是热稳定DNA聚合(Taq)酶,上图用反转录法来获得目的基因。

(3) A、B分别是含目的基因的DNA片段和质粒, C是重组质粒,此过程中,必须用同种限制酶切割A和B,使它们产生相同的粘性末端,再加入DNA连接酶,才可形成重组质粒。

(4)重组质粒必须含有目的基因、标记基因、复制原点外,还必须有启动子和终止子。

(5)为了使受体细胞更容易吸收重组质粒,可用处理 Ca2+处理,使其处于感受态。

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