Question

用限制酶BamHⅠ、HindⅢ单独或联合切割甲DNA分子（长度为14kb），在完全酶切（每个切点都被切断）时得到的DNA片段长度如图11所示（1kb即1000个碱基对）。图12显示了乙DNA分子上的BamHⅠ、HindⅢ的切点的情况。下列说法错误的是

A．甲DNA分子上没有BamHⅠ的酶切位点，有一个HindⅢ的酶切位点

B．甲DNA分子为环状DNA分子

C．用BamHⅠ和HindⅢ联合切割甲DNA分子，最多可能得到7种不同长度线性片段

D．用BamHⅠ和HindⅢ联合切割甲、乙DNA分子（所有切点都被切断），然后用DNA连接酶处理酶切产物，最多能得到7种由两个片段连接而成的环形重组DNA

Answer 1

A

解析试题分析：1该质粒为环状 DNA，经 SmaⅠ切割前，不含有游离的磷酸基团，经 SmaⅠ切割后形成平末端，含有 2 个游离的磷酸基团。 第 3 页 共 186 页 在2SmaⅠ识别的是 CCCGGG 序列， C 与 G 之间切割，SmaⅠ酶切位点越多，也就是 C—G碱基对越多，C 与 G 之间的氢键3 个比 A 与 T 之间的氢键2 个数量多，其含量越多，质粒的热稳定性越高。3据图 1 可知，SmaⅠ切割位点在抗生素抗性基因标记基因中，据图 2 可知，SmaⅠ切割位点在目的基因中，因此使用 SmaⅠ切割会破坏质粒的抗性基因、外源 DNA 中的目的基因。4用同一种限制酶处理质粒和外源 DNA，再用 DNA 连接酶连接时，往往会有三种连接形式：目的基因—质粒、目的基因—目的基因环化、质粒—质粒环化，后两种是我们不需要的，因而要进行筛选。用两种限制酶处理质粒和外源 DNA，因形成的末端不同可避免上述情况的发生。5连接质粒与目的基因的工具酶是 DNA 连接酶。6分析由 BamHⅠ和 HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源 DNA，并经拼接获得的重组质粒，这两种酶的识别序列仍然完整存在，如再用 BamHⅠ和 HindⅢ两种限制酶进行酶切时，可再度被切开，形成 2 种 DNA 片段；而 EcoR Ⅰ 的识别序列在原质粒中存在并没有破坏，同时切下的目的基因中还存在 1 个 EcoRⅠ的识别序列，因此在重组质粒中存在 2 个 EcoRⅠ的识别序列，如用 EcoRⅠ和 HindⅢ酶切，可得到 3 种 DNA 片段。A错误；B错误；C错误；D正确。
考点：本题考查 的知识。意在考查能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，能用文字、图表以及数学方式等多种表达形式准确地描述生物学方面的内容的能力。