[题目]干扰素是动物和人体细胞受到病毒感染后产生的一种糖蛋白.具有抗病毒.抑制细胞增殖及抗肿瘤作用.利用基因工程技术培育能生产干扰素的植物流程如图所示.请回答下列问题:(1)首先获取的动物干扰素基因称为 .利用PCR技术扩增干扰素基因时.设计引物序列的主要依据是 .(2)过程①中剪切质粒和目的基因时所需要的工具酶是和 .酶切后.目� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】干扰素是动物和人体细胞受到病毒感染后产生的一种糖蛋白，具有抗病毒、抑制细胞增殖及抗肿瘤作用。利用基因工程技术培育能生产干扰素的植物流程如图所示。请回答下列问题：

(1)首先获取的动物干扰素基因称为____________。利用PCR技术扩增干扰素基因时，设计引物序列的主要依据是____________。

(2)过程①中剪切质粒和目的基因时所需要的工具酶是________和________。酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列____________。

(3)过程②中将重组质粒导入根瘤农杆菌时。常用____________处理根瘤农杆菌，其目的是____________。

(4)在培育愈伤组织的固体培养基中，除了无机盐、有机营养物质、琼脂、植物激素外，还需添加卡那霉素。卡那霉素的作用是________________________________。在分子水平上通常采用____________技术检测干扰素基因是否导入受体细胞。

【答案】目的基因干扰素基因两端的部分核苷酸序列 BamHⅠ EcoRⅠ 不相同 Ca2+ 使其成为感受态细胞，最终使干扰素基因插入马铃薯细胞的 DNA上筛选出导入重组质粒的植物细胞 DNA分子杂交

【解析】试题分析：本题以图文结合的形式综合考查学生对基因工程的知识的识记和理解能力。解答本题需熟记并理解基因工程的基本操作程序并形成清晰的知识网络。在此基础上，依据图表中限制酶的切割位点及位置等信息并结合问题情境进行相关问题的解答。

(1) 在基因工程中，获取的动物干扰素基因称为目的基因。利用PCR技术扩增干扰素基因时，需要依据干扰素基因两端的部分核苷酸序列设计引物序列。

(2) 题图显示：干扰素基因中存在SmaⅠ的识别位点，若使用SmaⅠ切割质粒和外源DNA，则会破坏干扰素基因，因此过程①所示的构建重组质粒时不能使用SmaⅠ切割。BamHⅠ和EcoRⅠ的识别位点位于目的基因的两侧，质粒上也有BamHⅠ和EcoRⅠ的识别位点，因此，过程①中剪切质粒和目的基因时所需要的工具酶是BamHⅠ和EcoRⅠ。因BamHⅠ和EcoRⅠ的识别位点不同，所以酶切后，目的基因形成的两个黏性末端序列不相同。

(3) 过程②中将重组质粒导入根瘤农杆菌时，常用Ca2+处理根瘤农杆菌，使其成为感受态细胞，最终使干扰素基因插入马铃薯细胞的 DNA上。

(4) 重组质粒中含有的抗卡那霉素基因属于标记基因，其作用是鉴别受体细胞是否含有目的基因，便于筛选。可见，在培育愈伤组织的固体培养基中添加卡那霉素的作用是筛选出导入重组质粒的植物细胞。在分子水平上检测干扰素基因是否导入受体细胞，通常采用DNA分子杂交技术。

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（1）图中扩大培养的过程中应选用__________培养基。利用__________分离法可获得培养皿上菌落。

（2）图中②过程培养基的配方如下:

成分	无机盐	蔗糖	葡萄糖	尿素	牛肉膏	水	琼脂	酚红
培养基	+	-	+	+	-	+	+	-

结合图形分析__________(“能”或“不能”)得出结论:该细菌可利用尿素作为氮源。理由是:__________。

（3） B组培养基中还添加了适宜浓度的青霉素,结果如图所示。欲证明青霉素所起的作用是选择,则应选取__________(A. a1 B. a2 C. b1或b2或3 D.任意一个菌落)菌落继续培养在空白的A2培养皿中,待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的C培养皿中。

（4）预测上述A2和C培养皿中菌落的生长情况为__________(“相同”或“不同”),由此证明青霉素所起的作用是选择。

（5）下列关于微生物培养的叙述,正确的是（_____）

A.实验过程中所有器皿和培养基都必须用高压蒸汽灭菌法进行灭菌

B.实验操作过程中必须打开超净台上的紫外灯和过滤风

C.涂布分离法,单菌落更易分开,但操作更复杂

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纯合子		杂合子
基因型	表现型	基因型	表现型
AA	红色	Aa或AA1或AA2	红色
aa	纯白色	---	---
A1A1	红条白花	A1a	红条白花
A2A2	红斑白花	A1A2或A2a	红斑白花