Question

【题目】绵羊虽是第一种体细胞克隆成功的哺乳动物，但该技术体系仍然存在效率低下的问题，体外培养体系对绵羊体外胚胎发育至关重要。已有研究表明，在胚胎培养液中添加维生素C可显著提高猪体细胞克隆胚胎囊胚率，但不知对绵羊克隆胚胎囊胚率是否有影响，某兽医研究所对此进行了研究。下图为实验过程中获得重组细胞的大致过程，回答下列问题：

（1）图示实验二属于___________________移植，收集的小尾寒羊卵母细胞应培养到_______________________________（时期）进行去核，去核实际操作是用微型吸管吸出_________________________。

（2）下表分别为实验一和实验二在胚胎培养液中加入维生素C后的相关实验结果：

实验一：不同浓度维生素C对绵羊孤雌胚胎发育的影响

维生素C浓度/（molL-1）	重复次数	胚胎总数	卵裂率	桑椹胚率（桑椹胚数/卵裂数）	囊胚率（囊胚数/卵裂数）
0	3	120	82.80	26.47	15.73
50	3	141	82.37	28.60	20.92
100	3	99	83.89	21.70	14.34
200	3	80	85.56	22.61	12.29

实验二：维生素C对绵羊体细胞克隆胚胎发育的影响

维生素C浓度/（molL-1）	重复次数	胚胎总数	卵裂率	桑椹胚率（桑椹胚数/卵裂数）	囊胚率（囊胚数/卵裂数）
x	3	70	83.93	28.89	14.96
0	3	76	87.05	22.53	9.47

①题图中“孤雌激活处理”的实质是_________________________，进而能发育成早期胚胎，以便进行实验一。

②据表中数据可知，进行实验一可以为实验二提供_________________________，实验二中“x”处数据应为_________________________。

③综合实验一和实验二结果可说明_________________________。

Answer 1

【答案】体细胞核 减数第二次分裂中期（或M II中期） 细胞核和第一极体 激活卵母细胞使其增殖分化 所需的较适宜的维生素C浓度 50 在胚胎培养液中添加50μmol·L-1维生素C可显著提高绵羊孤雌胚胎发育和体细胞克隆胚胎囊胚率

【解析】

题图：涉及体细胞核移植、早期胚胎培养和孤雌生殖；

实验一、二：自变量为维生素C浓度，因变量为囊胚率（囊胚数/卵裂数）、卵裂率、桑椹胚率（桑椹胚数/卵裂数）。

（1）据图可知，实验二属于体细胞核移植，收集的小尾寒羊卵母细胞到减二中期时为最适合接受核移植的，此时第一极体与卵母细胞紧密接触，故在使用微型吸管吸取卵母细胞核的同时会将第一极体吸出。

（2）①题图中“孤雌激活处理”是为了使次级卵母细胞单独发育为胚胎，故其实质为激活卵母细胞使其增殖分化；②据表中数据可知，实验一相当于实验二的预实验，可为实验二提供胚胎发育较适宜的维生素C浓度；“x”浓度下桑葚胚率和囊胚率都显著高于浓度为0时，结合前文推知“x”为50。③综合比较实验一和实验二各浓度下的数据，在胚胎培养液中添加50μmol·L-1维生素C可显著提高绵羊孤雌胚胎发育和体细胞克隆胚胎囊胚率。