Question

8．表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基的配方．请回答：

试剂	牛肉膏	蛋白胨	NaCl	琼脂	水	-
用量	5g	10g	5g	20g	1000mL	-

（1）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐．上述培养基配方中能充当碳源的成分是牛肉膏和蛋白胨．培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行灭菌处理．
（2）分离纯化微生物最常使用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法．
（3）假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？（列举两项）稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程灭菌不严格，受到微生物的污染．

Answer 1

分析 培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质．营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水．根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等根据用途分选择培养基、鉴别培养基．根据性质分为液体、半固体和固体培养基．

解答 解：（1）培养基中都应含有水、无机盐、碳源、氮源．培养基配制完成后要调pH和灭菌．牛肉膏、蛋白胨中含碳元素，可作为有机碳源．
（2）分离纯化微生物用平板划线法或稀释涂布平板法．
（3）稀释涂布平板时，稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程灭菌不严格，受到微生物的污染等原因，都会导致培养结束后，培养基上菌落连成一片．
故答案为：
（1）氮源　牛肉膏和蛋白胨　灭菌
（2）平板划线法　稀释涂布平板法
（3）稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程灭菌不严格，受到微生物的污染

点评 本题主要考查微生物的培养和分离，要求考生能够识记培养基的成分，识记分离纯化微生物的两种方法，意在强化学生对相关知识的识记和理解，提高学生的实验技能．