Question

14．请回答下列有关生物及其技术的问题：
（1）在腐乳的制作过程中，有多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是毛酶．微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸．
（2）平板划线法接种时，如果划线5个区域，灼烧接种环6次．
（3）某同学得到10¹、10²、10³倍稀释液计数的平均菌落数分别为760、269、16，则菌落总数为2.69×10⁵个/mL（所用稀释液的体积为0.1mL）．
（4）选择培养基能够“浓缩”所需微生物，“浓缩”的含义是适应本环境的微生物大量繁殖，不适应的微生物被抑制．
（5）萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有较高沸点．萃取时为了防止加热时有机溶剂挥发，还要在加热瓶口安装回流冷凝装置．

Answer 1

分析 1、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型．腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸．
2、平板划线法接种微生物时，在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环．

	第一次灼烧	每次划线之前灼烧	划线结束灼烧
目的	避免接种环上可能存在的微生物污染培养基	杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种	杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染或感染操作者

3、统计菌落数目的方法
（1）显微镜直接计数法
 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌．
（2）间接计数法（活菌计数法）
 ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌．通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌．
②操作
a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性．
b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．
③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数

解答 解：（1）在腐乳的制作过程中，有多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是毛霉．蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸．
（2）平板划线法接种时，每次划线前都要灼烧接种环，最后划线接受后也要灼烧接种环，因此划线5个区域，需要灼烧接种环6次．
（3）某同学得到10¹、10²、10³倍稀释液计数的平均菌落数分别为760、269、16，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，因此菌落总数为269×10²×$\frac{1}{0.1}$=2.69×10⁵个/mL（所用稀释液的体积为0.1mL）．
（4）选择培养基能够“浓缩”所需微生物，“浓缩”的含义是适应本环境的微生物大量繁殖，不适应的微生物被抑制．
（5）萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有较高的沸点，能够充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶等特点．萃取时为了防止加热时有机溶剂挥发，还要在加热瓶口安装回流冷凝装置．
故答案为：
（1）毛霉     肽和氨基酸    脂肪酶
（2）6
（3）2.69x10⁵
（4）适应本环境的微生物大量繁殖，不适应的微生物被抑制
（5）较高    回流冷凝

点评 本题考查腐乳的制作、微生物的分离和培养、从生物材料中提取某些有效成分等，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的方法、实验现象的等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．