Question

7．口蹄疫是由RNA病毒引起的一种偶蹄动物传染病．科学家尝试利用转基因番茄生产口蹄疫疫苗（其主要成分是该病毒的一种结构蛋白VPl），过程如图所示．请据图回答下列问题：

（1）图示②成功构建重组质粒的过程中，需要用到的工具酶是限制性核酸内切酶、DNA连接酶．
（2）图示⑤⑥代表的过程分别是脱分化、再分化．
（3）若要检测转化成功的番茄植株，除检测标记基因的产物外，还可采用分子杂交技术，检测目的基因在番茄体内是否转录．
（4）图示⑤⑥⑦代表的过程所涉及的生物工程技术是植物细胞工程（或植物组织培养）．
（5）在该过程中，研究人员首先获取了目的基因，并采用PCR技术，对目的基因进行扩增．该技术需要的条件是：引物、酶、原料和模板；然后构建基因表达载体．基因表达载体中，除了具有目的基因、启动子、终止子及复制原点之外，还需具有标记基因．
（6）图中将目的基因导入受体细胞的方法是农杆菌转化法．

Answer 1

分析 图示表示利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗，而口蹄疫病毒的遗传物质为RNA，因此要获得目的基因必须使用逆转录的方法获得．
①表示目的基因的获取、②表示目的基因与运载体重组、③表示目的基因导入农杆菌、④表示利用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞、⑤⑥⑦表示利用植物的组织培养技术培育转基因植株．

解答 解：（1）图示②成功构建重组质粒的过程中，首先需要利用同种限制酶切割目的基因和质粒，然后利用DNA连接酶将质粒和目的基因之间的黏性末端进行连接．
（2）图中⑤⑥⑦表示利用植物的组织培养技术培育转基因植株的过程，⑤表示脱分化形成愈伤组织，⑥表示再分化形成番茄幼苗．
（3）若要检测转化成功的番茄植株，除检测标记基因的产物外，还可采用分子杂交技术，检测目的基因在番茄体内是否转录．
（4）图示⑤⑥⑦过程表示植物组织培养，该技术属于植物细胞工程的范畴．
（5）在该过程中，研究人员首先获取了目的基因，并采用PCR技术，对目的基因进行扩增．该技术需要的条件是：引物、酶、原料和模板；然后构建基因表达载体．基因表达载体中，除了具有目的基因、启动子、终止子及复制原点之外，还需具有标记基因．
（6）图中将目的基因导入受体细胞的方法是 农杆菌转化法．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶   DNA连接酶　
（2）脱分化  再分化　
（3）分子杂交　
（4）植物细胞工程（或植物组织培养）　
（5）模板　标记基因　
（6）农杆菌转化法

点评 本题难度适中，具有一定的综合性，考查了基因工程、植物组织培养技术等知识，要求考生具有一定的识图能力、识记能力、知识的迁移能力．考生要识记PCR技术的原理以及需要的条件，识记植物组织培养的过程以及愈伤组织的特点，识记基因工程的原理等．