Question

回答有关微生物的问题
纤维素酶对于能否实现乙醇工业化生产、处理服装面料等具有重要的意义，研究者初步筛选到能合成纤维素酶的菌株MC-1，以下是该菌株的鉴定过程．
（1）为了获得能合成纤维素酶的单菌落，可采用

 

法将初筛菌液接种在固体培养基上，这种培养基属于

 

培养基．
（2）关于制备固体培养基的叙述，错误的是

 

．
A．制作固体培养基时可以加入琼脂．
B．操作的顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
C．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板
D．待平板冷却凝固约5-10min后将平板倒过来放置．
（3）实验过程中如何防止其他微生物的污染？

 

．
（4）如表的培养液pH均为4.8，若对MC-1中纤维素酶的活力进行测定，则不能选择表中的

 

的培养液．（多选）

培养液	纤维素	纤维素酶	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	KCl	MgSO4?7H2O	FeSO4
A	25g/L	-	-	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
B	-	-	3g/L	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
C	25g/L	1μg/L	-	3g/L	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L
D	25g/L	-	3g/L	-	1g/L	0.5g/L	1g/L	0.01g/L

（5）分离获得了具有较高纤维素酶活性的菌株MC-1，为了在此基础上获得纤维素酶活性更高的菌株，最可行的做法是

 

．

Answer 1

考点：微生物的分离和培养,酶活力测定的一般原理和方法

专题：

分析：本题是对常用的微生物的接种方法、培养基的成分和培养基配制过程、微生物实验室培养过程中的无菌技术和选择培养基的选择作用的综合性考查，回忆常用的微生物的接种方法、培养基的成分和培养基配制过程、微生物实验室培养过程中的无菌技术和选择培养基的选择作用，然后结合问题进行解答．

解答： 解；（1）分离和筛选菌种以获得单菌落菌株常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法；所用的培养基从功能上分属于选择培养基．
（2）制备固体培养基的流程是计算→称量→熔化→灭菌→到平板．
（3）微生物实验室培养中防止微生物污染的措施有：培养基灭菌、接种过程无菌操作，培养过程应在无菌条件下进行等．
（4）分析题干信息可知，该实验的目的是菌株MC-1中纤维素酶的活力，因此所用的培养基应该是纤维素作为唯一碳源的培养基，且培养基的基本成分应包括碳源，氮源、水和无机盐，分析性表格中的培养基的成分可知，A培养基缺乏氮源，微生物不能生长；B没有碳源，微生物应为无法生长，C不是以纤维素为唯一碳源，牛肉膏也可以作为碳源，因此A、B、C不能用于对MC-1中纤维素酶的活力进行测定的培养基．
（5）可以用紫外线照射方法处理菌种，诱发基因突变，从中筛选出具有更高高纤维素酶活性的菌株．
故答案为：
（1）划线法或涂布法   选择
（2）B  
（3）培养基灭菌、接种过程无菌操作（接种环境灭菌，试管过火、超净工作台）
（4）A、B、C  
（5）用人工诱变（紫外线照射等）处理菌株，再进行筛选

点评：对常用的微生物的接种方法、培养基的成分和培养基配制过程、微生物实验室培养过程中的无菌技术和选择培养基的选择作用的综合理解，把握知识点间的内在联系是解题的关键．