Question

12．为研究双氢青篙素（DHA）对人结肠癌HCT116细胞的作用，科研人员提出以下实验思路：
（1）取HCT116细胞用胰酶消化后，再用含血清的培养液制成细胞悬液，分别接种于4块培养板（一种多孔的细胞培养器具）的培养孔内，置于CO₂培养箱内培养12h．
（2）取出培养板，吸弃培养孔内上清液后向每孔中加入含有不同浓度DHA的培养液（浓度分别为0、125、250、500nmol/L），每个浓度加3个培养孔，置于培养箱内培养．其它培养板也做相同处理．
（3）分别于加药后12、24、48、72h后，各取一块培养板，采用MTT检测法测定各孔内培养液的光吸收值（OD值），计算抑制率[抑制率=（1-$\frac{加药组OD}{对照组OD}$）×100%]．
（说明：MTT，即四唑氮蓝，它能被活细胞线粒体中一种与柠檬酸循环有关的酶还原成不溶于水的蓝紫色结晶，而死细胞中此酶无活性，不能产生蓝紫色结晶．故可经相关处理后测OD值反映细胞存活率和抑制率．）
请回答：
（1）实验目的是：探究DHA浓度及给药时间对人结肠癌HCT116细胞的抑制作用（探究DHA浓度及给药时间对人结肠癌HCT116细胞的抑制效应）
（2）请设计一张表格用于记录实验时所测得的数据，便于抑制率的计算．
（3）实验中需要控制的无关变量有温度、培养液pH、细胞数、孔内添加培养液的量等（至少写出两个）．每个DHA浓度需加3个培养孔，是为了求平均值，减少实验误差．
（4）若最终的实验结果以坐标图呈现，则纵坐标应标识为抑制率．

Answer 1

分析 分析实验可知，实验的自变量为“不同浓度DHA的培养液”，实验的因变量为“各孔内培养液的光吸收值”，并且OD值反映细胞存活率和抑制率，由此可以确定实验的目的为探究DHA浓度及给药时间对人结肠癌HCT116细胞的抑制效应．

解答 解：（1）分析实验的自变量和因变量，并且培养液的光吸收值（OD值）就是抑制率，因此实验的目的为探究DHA浓度及给药时间对人结肠癌HCT116细胞的抑制作用．
（2）表格的横列为加药后12、24、48、72h的时间，纵列为浓度分别为0、125、250、500nmol/L，并且每个浓度有三个培养孔，同时增加一个平均值，表格如答案所示．
（3）实验中需要控制的无关变量有温度、培养液pH、细胞数、孔内添加培养液的量等（至少写出两个）．每个DHA浓度需加3个培养孔，是为了求平均值，减少实验误差．
（4）若最终的实验结果以坐标图呈现，横坐标表示时间，纵坐标应标识为抑制率，然后用四条不同的曲线表示四种不同的浓度．
故答案为：
（1）探究DHA浓度及给药时间对人结肠癌HCT116细胞的抑制作用（探究DHA浓度及给药时间对人结肠癌HCT116细胞的抑制效应，其他合理答案也可）
（2）（表格共（4分），其中时间（1分），浓度（1分），OD值（1分），孔1-3及平均值1分）

（3）温度、培养液pH、细胞数、孔内添加培养液的量等     求平均值，减少实验误差
（4）抑制率

点评 本题以双氢青篙素为题材，考查了与动物细胞培养有关的实验探究，要求考生能够通过实验的分析确定实验的自变量、因变量以及无关变量，从而确定实验探究目的，设计实验表格，具有一定的难度．