Question

17．尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后，才能被植物吸收利用．分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解．某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	琼脂
1.4g	2.1g	0.2g	1.0g	10.0g	1.0g	15.0g

（1）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？不能（能/不能），原因是培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只分解尿素为氮源的微生物．
（2）下列材料或用具中：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶和吸管；③实验操作者的双手．需要灭菌的是：①和②；需要消毒的是：③．（填序号）
（3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用稀释涂布平板法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目 就能大约推测出样品中活菌数．
（4）该同学设想：由活性脲酶和尿素混合，制成“加酶尿素”，尿素肥效一定更高．为了提高“加酶尿素“中脲酶的利用率，应当采用酶的固定化技术．

Answer 1

分析 1、选择培养基的概念是：在微生物学中，将允许特定微生物种类生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基，由于分解尿素的细菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解，因此在以尿素为唯一氮源的培养基上，分解尿素的菌能以尿素为氮源生长，而不能分解尿素的菌因缺乏氮源而无法生长．
2、常用的接种微生物的方法有稀释涂布平板法和平板划线法，稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液涂布到固体琼脂培养基上，进行培养，在稀释度足够高的菌液里，将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，获得由单个细胞繁殖而来的菌落．

解答 解：（1）尿素分解菌所需要的氮源是尿素，据表分析，表中的蛋白胨可以为微生物的生存提供氮源，所以不能分离尿素分解菌，筛选纤维素分解菌需要以纤维素为唯一的碳源的选择培养基．
（2）①培养细菌用的培养基与培养皿和②玻棒、试管、锥形瓶和吸管需要灭菌处理，而③实验操作者的双手只需要消毒．
（3）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用稀释涂布平板法接种，根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数目 就能大约推测出样品中活菌数．
（4）为了提高“加酶尿素“中脲酶的利用率，应当采用酶的固定化技术．
故答案为：
（1）不能  培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能选择出只分解尿素为氮源的微生物
（2）①和②③
（3）稀释涂布平板  菌落数目 
（4）酶的固定化

点评 本题以培养基成分的表格为载体，主要考查尿素分解菌的筛选与分离，意在强化学生对相关知识点的识记与理解．