Question

12．回答下列有关微生物的问题：
临床使用抗生素前，有时需要进行细菌的耐药性实验．试验时，首先从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤进行操作，以确定从病人身上获得的致病菌对不同抗生素的敏感性．
（1）取该致病菌单菌落适当稀释，用涂布法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板．
（2）为了检测获得的致病菌对于抗生素的敏感性，将含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片分别均匀地放置在四块平板上，培养一段时间后，得到的结果为：含A抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对A抗生素敏感；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明该致病菌对C的敏感性比对A弱；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个小菌落，在排除杂菌污染的情况下，很可能此菌对D抗生素产生了耐药性．
（3）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素A．
（4）下面的甲图表示酵母菌、硝化细菌和乳酸菌在半固体培养基中的生长情况，乙图表示这三种菌的增殖速度与氧浓度之间的关系，请据图作答：

①乙中a、b、c三条曲线分别表示甲中3号试管、2试管和1试管中微生物在不同氧气浓度中的增殖速度．
②研究发现，青霉素能破坏细菌的细胞壁并在细菌细胞的繁殖期起杀菌作用．如果培养基中混杂了这三类微生物；设计实验，利用改变培养基成分等条件，将酵母菌和硝化细菌分离出来．要分离出酵母菌的方法是培养基成分加抗生素；要分离出硝化细菌的方法是培养基成分不加有机碳源．

Answer 1

分析 （1）接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法．接种的目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细菌繁殖而成的子细胞群体--菌落．
（2）分析甲图：1号试管中的菌体集中在培养液的表层，说明是好氧性硝化细菌；2号试管的菌体在培养液的均匀分布，说明是兼性厌氧性的酵母菌；3号试管的菌体集中在培养液的底层，说明是厌氧性的乳酸菌．
（3）分析乙图：a曲线，随着氧气浓度增加，微生物的繁殖速度减慢，说明是乳酸菌；b无氧时繁殖速度较慢，随着氧气浓度增加，微生物的繁殖速度增加，说明是酵母菌；c氧气浓度到一定程度，才能繁殖，说明是硝化细菌．

解答 解：（1）分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法．取该单菌落适当稀释，使其“均匀生长”的方法是用涂布法接种于固体培养基表面，适宜温度培养．
（2）在抗药性检验过程中，如果在菌落周围出现透明的圆圈，说明此种抗生素可抑制该细菌；透明圈的大小表示着此种抗生素抗菌的强弱．将分别含有A、B、C三种抗生素的滤纸均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该病菌对抗生素B不敏感；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明该病菌对C的敏感性比对A的弱．含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的耐药菌．
（3）根据（2）的分析，实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好．
（4）①乙图中a曲线，随着氧气浓度增加，微生物的繁殖速度减慢，说明是乳酸菌，对应于3号试管；b无氧时繁殖速度较慢，随着氧气浓度增加，微生物的繁殖速度增加，说明是酵母菌，对应于2号试管；c氧气浓度到一定程度，才能繁殖，说明是硝化细菌，对应于1号试管．
②在培养基中加入抗生素，只有酵母菌能生长；硝化细菌为化能自养型的生物，可以合成有机物供自身利用，接种到不含有机碳源的培养基中，可分离出硝化细菌．
故答案为：
（1）涂布   
（2）敏感    该致病菌对C的敏感性比对A弱   耐药性   
（3）A
（4）①3   2   1   ②加抗生素    不加有机碳源

点评 本题的知识点是微生物培养过程中的接种方法，以及分析实验结果获取结论的能力和，利用所学的微生物知识解决生活问题的能力，解决问题的关键是运用所学过的知识点“透明圈”，进行知识点的迁移、类比，然后解决问题．