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      某目的基因，通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达。下列叙述错误的是

      A. 大肠杆菌成功表达至少含一个重组质粒

      B. 大肠杆菌成功表达，说明目的基因肯定通过转录与翻译产生对应的蛋白质

      C. 质粒pET28b至少含一个限制性核酸内切酶识别位点

      D. 重组质粒一定含目的基因，能稳定存在宿主细胞

    B

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    科目：高中生物 来源：2012-2013学年吉林省吉林市十二中高二3月月考生物试卷（带解析） 题型：综合题

    下列是有关基因工程和细胞工程的问题，请据图分析回答

    科学家通过基因工程，成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉，其过程大致如上图所示。
    (1) 细菌的基因之所以能“嫁接”到棉花细胞内，原因是                  。
    （2）为在短时间内大量获得目的基因，可用            扩增的方法，其原理是                。
    (3)目的基因获取之后，需要进行                                  ，其组成，必须有                  、目的基因、           以及标记基因等。此步骤是基因工程的核心。
    （4)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA的                                  特点。Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为            。 
    （5）上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用了           法，这种导入方法较经济、有效。目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是                           ，（2分）还需要通过检测才能知道，检测采用的方法是           。（2分）
    （6）在抗虫棉培育过程中，受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是                    ，该过程采用的技术是                      。
    （7）某棉农在食用该抗虫棉种子压榨的棉籽油炒芹菜后，出现鼻塞流涕，皮肤骚痒难忍症状。停用一段时间后这些症状会自然消失，该现象很可能是                。

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    科目：高中生物 来源：2014届吉林省吉林市高二3月月考生物试卷（解析版） 题型：综合题

    下列是有关基因工程和细胞工程的问题，请据图分析回答

    科学家通过基因工程，成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉，其过程大致如上图所示。

    (1) 细菌的基因之所以能“嫁接”到棉花细胞内，原因是                  。

    （2）为在短时间内大量获得目的基因，可用            扩增的方法，其原理是                。

    (3)目的基因获取之后，需要进行                                  ，其组成，必须有                  、目的基因、           以及标记基因等。此步骤是基因工程的核心。

    （4)Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T-DNA，把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中是利用了T-DNA的                                  特点。Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内并成功实现表达的过程，在基因工程中称为            。 

    （5）上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用了           法，这种导入方法较经济、有效。目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是                           ，（2分）还需要通过检测才能知道，检测采用的方法是           。（2分）

    （6）在抗虫棉培育过程中，受体细胞如果采用愈伤组织细胞，与采用叶肉细胞相比较，其优点是                    ，该过程采用的技术是                      。

    （7）某棉农在食用该抗虫棉种子压榨的棉籽油炒芹菜后，出现鼻塞流涕，皮肤骚痒难忍症状。停用一段时间后这些症状会自然消失，该现象很可能是                。

     

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    科目：高中生物 来源：2013届辽宁省盘锦市高二下学期期初考试生物试卷（解析版） 题型：综合题

    （14分）回答有关生物工程的问题：

    （1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生__末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_（相同不同）粘性末端的限制酶。

    （2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是提供________特异性识别结合位点，驱动基因转录。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用___处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与__________杂交，该杂交技术称为_________。

    （3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的______中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将_____插入植物细胞的染色体___上。

    (4)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。

    (5)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。改PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。

    (6)利用生物反应器培养家蚕细胞时，细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

     

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    科目：高中生物 来源：2013届河南省高二3月月考生物试卷 题型：综合题

    回答有关基因工程的问题：（9分）

    （1） 构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生   _    末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生_____（相同，不同）粘性末端的限制酶。

    （2）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是                                                     。在用表达载体转化大肠杆菌时，常用    处理大肠杆菌，以利于表达载体进入：为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的           片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为                  。为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成                 _，常用抗原-抗体杂交技术。

    （3）如果要将某目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的       _     中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的        _上。

     

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