Question

【题目】人血清蛋白（HSA)具有重要的医用价值。下图是以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的两条途径。

(1)如果HSA基因序列未知，可以采用____________的方法获取该目的基因，为了使目的基因能够在宿主细胞中复制和稳定保存，通常要先构建_____________后才能导入宿主细胞。

(2)方框中的“？”一般选用的生物是________,为了提高II过程的导入成功率，通常用________处理大肠杆菌。

(3)人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性，所以，选择_____途径（填I或II)获取rHSA更有优势。

(4)为了鉴定宿主细胞中是否产生rHSA,可以用_____________方法来进行检验。

A.检验HSA基因是否导入

B.检验细胞中是否产生相应的mRNA

C.抗原、抗体杂交

D.检测是否有标记基因

Answer 1

【答案】 从基因文库中提取 重组DNA 农杆菌 氯化钙 I C

【解析】试题分析：据图分析，I过程将目的基因导入的是植物细胞，一般采用农杆菌转化法，示意图中？表示的是农杆菌；II过程的受体细胞是大肠杆菌，而大肠杆菌是原核生物，细胞中没有内质网和高尔基体，所以该过程产生的蛋白质一般没有生物活性。

（1）如果HSA基因序列未知，则不能人工方法合成或通过PCR技术扩增，则只能采用从基因文库中提取的方法获取该目的基因；为了使目的基因能够在宿主细胞中复制和稳定保存，通常要先构建基因表达载体（重组DNA）后才能导入宿主细胞。

（2）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，因此方框中的“？”一般选用的生物是农杆菌；将目的基因导入微生物细胞时常有感受态细胞法，即用氯化钙处理微生物细胞，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态。

（3）由于大肠杆菌是原核生物，其细胞中不含内质网和高尔基体，而人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性，所以选择I途径获取rHSA更有优势。

（4）检测目的基因是否表达形成蛋白质可以采用抗原-抗体杂交法。