Question

【题目】为增强玉米抗旱性，研究者构建含有某微生物抗旱基因E的重组质粒，用农杆菌转化法转入玉米幼胚组织细胞中，获得抗旱的转基因玉米。下列相关叙述不正确的是

A.提取该微生物mRNA反转录为cDNA，通过PCR可获得大量目的基因

B.将重组质粒置于经CaCl2处理的农杆菌悬液中，可以获得转化的农杆菌

C.用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞需要严格进行无菌操作

D.用E蛋白的抗体进行抗原-抗体杂交，可在个体水平检测转基因玉米的抗旱性状

Answer 1

【答案】D

【解析】

1、基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

2.农杆菌转化法的原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。

A、提取组织mRNA进行逆转录后得到的cDNA可以作为PCR的模板，PCR技术体外扩增获得大量目的基因，A正确；

B、用CaCl2处理农杆菌，使其处于易于吸收周围环境中的DNA分子的感受态，有利于目的基因导入受体细胞，B正确；

C、用农杆菌转化法将E基因转入玉米幼胚组织细胞进行植物组织培养时，需要严格无菌操作，保证无菌环境，C正确；

D、用E蛋白的抗体进行抗原-抗体杂交，检测到玉米细胞中具有E蛋白基因，但E蛋白基因不一定能成功表达，因此培育出的玉米不一定具有抗旱能力，D错误。

故选D。