Question

2．雅安市城区居民用水取自于青衣江上游，为保障居民用水安全，相关单位需要定期检测水源中细菌种类及数量，以确定水质是否达标．请回答下列问题：
（1）制备牛肉膏蛋白胨培养基的步骤是计算→称量→熔化→灭菌→倒平板．其中对培养基灭菌的方法是
高压蒸汽灭菌．为避免杂菌污染，倒平板时应当在酒精灯火焰旁进行．
（2）培养基中的牛肉膏主要为细菌提供碳源、氮源（无机盐）营养成分．培养细菌的pH应调节至中性或微碱性．
（3）要统计水源中的活菌总数，应该采用的方法是稀释涂布平板法．工作者将三个接种了等量水源水的培养基置于37℃的恒温箱中培养．24小时后观察到三个平板上的菌落数目为21、256、215，请分析结果出现的可能原因并提供解决方案：原因：涂布第一个平板时涂布器未冷却就涂布平板（后两个平板被污染；操作失误）；方案：重做实验．

Answer 1

分析 1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板．
2、微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度．无菌技术的主要内容：
①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触．

解答 解：（1）制备牛肉膏蛋白胨培养基的步骤是计算→称量→熔化→灭菌→倒平板．其中对培养基灭菌的方法是高压蒸汽灭菌．为避免杂菌污染，倒平板时应当在酒精灯火焰旁进行．
（2）培养基中的牛肉膏主要为细菌提供碳源、氮源（无机盐）等营养成分．培养细菌的pH应调节至中性或微碱性．
（3）要统计水源中的活菌总数，应该采用稀释涂布平板法．根据题干信息可知，第一个平板菌落数偏低，可能是涂布第一个平板时涂布器未冷却就涂布平板；后两个平板菌落数偏高，因此也可能是后两个平板被污染，因此最好重复实验．
故答案为：
（1）倒平板     高压蒸汽灭菌      酒精灯火焰旁
（2）碳源、氮源（无机盐）      中性或微碱性
（3）稀释涂布平板法      原因：涂布第一个平板时涂布器未冷却就涂布平板；（后两个平板被污染；操作失误）（其他合理答案均可）方案：重做实验

点评 本题考查微生物分离和培养的有关知识，要求考生能够识记培养基的成分，掌握培养基制备的一般步骤，能够对实验结果中出现的异常现象进行原因分析，并提供解决方案．