Question

【题目】人外周血单核细胞能合成白介素2（IL-2），该蛋白可增强机体免疫功能，但在体内易被降解。研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白（HSA）基因拼接成一个融合基因，并在酵母菌中表达，获得具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2- HSA融合蛋白。其技术流程如图。请回答：

（1）图中②过程需要______________酶的参与。

（2）表达载体1中的位点__________，应为限制酶BglⅡ的识别位点，才能成功构建表达载体2。

（3）表达载体2导入酵母菌后，融合基因转录出的 mRNA中，与IL-2蛋白对应的碱基序列不能含有_______（起始、终止）密码子，才能成功表达出IL-2-HSA融合蛋白。

（4）应用_____________杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL-2- HSA融合蛋白。

Answer 1

【答案】（1）反（或逆）转录

（2）a

（3）终止

（4）抗原-抗体

【解析】

试题分析：（1）图中②mRNA→cDNA，表示逆转录过程。

（2）根据目的基因IL-2cDNA的两端的酶切位点分别是EcoRⅠ和BglⅡ，所以表达载体1也必须有这两个酶切位点，表达载体1上已有EcoRⅠ，推测位点a应含有BglⅡ。

（3）融合基因转录出的mRNA中与IL-2蛋白对应的碱基序列中不能含有终止密码，才能成功表达出IL-2-HsA融合蛋白．否则HSA蛋白将无法合成。

（4）应用抗原-抗体杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL-2-HSA融合蛋白。