Question

3．棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素．现在环保工作小组正进行作物深加工，变废为宝．
（1）作物秸秆中的纤维素在纤维素酶的作用下最终被水解成葡萄糖才能供给酵母利用，纤维素酶是复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将纤维二糖分解成葡萄糖．除碳源外，培养基成分还应该有氮源、无机盐和水等．
（2）能分解纤维素的微生物能合成纤维素酶，多见于腐殖土中，如纤维弧菌、噬胞菌等．分离纤维素分解菌常用的方法是刚果红染色法．其实验流程是：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落．实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于A内．
A．①B．①②C．②③D．①②③
（3）将获得的3种微生物甲、乙和丙分别接种在相同的选择培养基中继续培养（其他营养充足、且条件适宜），观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为18h、21h、42h，应选择微生物甲作为菌种进行后续培养．后续分离纯化的工程中，若要测定培养液中的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接记录．
（4）为了保持菌种纯净，对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，将菌种接种到试管的固体斜面培养基上，在合适的温度下培养．

Answer 1

分析 纤维素的单体是葡萄糖，纤维素酶能够将纤维素分解为葡萄糖．纤维素酶是一种复合酶，主要包括C₁酶、C_x和葡萄糖苷酶．纤维素分解菌能够产生纤维素酶，常用刚果红染色法分离纤维素分解菌，能够产生透明圈的菌落计数纤维素分解菌菌落．据此分析作答．

解答 解：（1）纤维素酶是一种复合酶，主要包括C₁酶、C_x和葡萄糖苷酶，其中葡萄糖苷酶可以将纤维二糖分解为葡萄糖．培养基中的主要成分有碳源、氮源、水和无机盐等．
（2）分离纤维素分解菌常用的方法是刚果红染色法．分离纤维素分解菌的实验流程是：土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选产生透明圈的菌落．刚果红染液与纤维素结合呈红色，实验时纤维素分解菌产生纤维素酶将纤维素分解，可以形成以纤维素分解菌菌落为中心的透明圈，得到的菌落如图中的①，故选：A．
（3）在三组使用中，甲组所用时间最短，说明生长能力最强，所以应选择甲组中的微生物作为菌种进行后续培养．测定培养液中选定菌种的菌体数，既可以在显微镜下用血细胞计数板（显微镜直接计数法），也可以进行稀释涂布平板法进行计数．
（4）临时保藏法保存菌种需要将菌种接种到试管的固体斜面上培养基上，在合适的温度下培养．
故答案为：
（1）葡萄糖苷酶        氮源
（2）刚果红染色法      梯度稀释       透明圈      A
（3）甲       血细胞计数板
（4）固体斜面

点评 本题主要考查纤维素分解菌的筛选、培养、计数等内容，意在强化学生对相关知识点的识记与理解．