Question

2．生物技术与我们的生活息息相关．请回答下列问题：
（1）PCR技术能把某DNA分子片断进行扩增，依据的原理是DNA复制；每次循环需要经过变性、复性、延伸三步．
（2）在果醋制作时，运用醋酸菌在供应氧气和糖源充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸．请写出酒精生成醋酸的化学反应式：C₂H₅OH+O₂→CH₃COOH+H₂O．
（3）制作泡菜时蔬菜在腌制过程中，会产生亚硝酸盐．在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色溶液．
（4）进行月季花药离体培养，一般选择在五月初到五月中旬开的花．对于花粉而言，要采用单核（单核居中到单核靠边）期的花粉，为了鉴定该时期的花粉，常采用醋酸洋红法进行染色鉴定．若是某些植物花粉细胞不易着色，常采用焙花青-鉻矾法法染色，能将花粉的细胞核染成蓝黑色．
（5）分离、纯化菌种时为得到单菌落，常用平板划线法和稀释涂布平板法接种．

Answer 1

分析 1、PCR技术：
（1）概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术．
（2）原理：DNA复制．
（3）前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物．
（4）条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）
（5）过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链．
2、纯化微生物的方法
①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面．
②稀释涂布平板法：将骏业进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养．
3、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：
当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．
当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸．
4、测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量．

解答 解：（1）PCR技术的原理是DNA复制；每次循环需要经过变性、复性、延伸三步．
（2）在果醋制作中，当糖源和氧气充足时，醋酸菌能将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，醋酸菌可以利用酒精生成醋酸，其化学反应式为：C₂H₅OH+O₂→CH₃COOH+H₂O．
（3）在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色溶液．
（4）对月季来说，适宜花粉培养的时期是花粉应处于单核期，因为单核期，细胞核由中央移向一侧的时期，花药培养成功率最高，而且这个时期对离体刺激敏感，一般要通过镜检（显微镜观察）来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，对于花粉细胞核不容易着色的植物常用的染色剂是焙花青-铬矾溶液．
（5）分离、纯化菌种时为得到单菌落，常用平板划线法和稀释涂布平板法接种．
故答案为：
（1）DNA复制   变性  
（2）氧气    C₂H₅OH+O₂→CH₃COOH+H₂O
（3）盐酸酸化     重氮化       玫瑰红
（4）单核（单核居中到单核靠边） 焙花青-鉻矾法  蓝黑 
（5）平板划线  稀释涂布平板

点评 本题综合考查PCR技术、果酒和果醋的制作、植物组织培养、微生物的分离和培养等知识，要求考生识记PCR技术的原理及操作步骤；识记果酒和果醋制作的原理；识记植物组织培养的过程及注意事项；识记微生物接种常用的两种方法及注意事项，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查．