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大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出b半乳糖苷酶。如果培养基中含有IPTG和X-gal,X-gal便会被b半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达b半乳糖苷酶,培养基中X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题:

(1)作为受体大肠杆菌应__________________________,以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用__________处理过的受体大肠杆菌,置于试管Ⅱ中,并加入在试管Ⅰ中制备好的DNA。

(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入____________________等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。

(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果:

                                                        

                                                        

                                                        

(1)不含氨苄青霉素抗性基因(或对氨苄青霉素敏感)     Ca2+

(2)IPTG、X-gal、氨苄青霉素

(3)①如果长出白色菌落,说明重组质粒已导入受体大肠杆菌

②如果未长出菌落,说明重组质粒未导入受体大肠杆菌

③如果长出蓝色菌落,说明自连的运载体pUC118质粒已转入受体大肠杆菌,但目的基因没有接入运载体

练习册系列答案
相关习题

科目:高中生物 来源: 题型:阅读理解

大肠杆菌是生物学及医学实验研究中最有代表性的模式生物之一。

(1)大肠杆菌与饮水安全。

    国家规定,每升饮用水中大肠菌数不得超过3个。有人测定某饮用水中的大肠杆菌(群)数:先将1升饮用水水样浓缩至10毫升,然后各取浓缩水样的2毫升,涂布到5个培养皿中进行培养,培养后计数的菌落数分别是9、12、5、8、6。请回答下列问题:

1)根据上述结果计算,被检水样大肠菌群数为________,水样________ (能、不能)达标。2)检测过程中需要培养大肠菌菌群,培养基配方如下:

琼脂

蛋白胨

乳糖

蔗糖

K2HPO4

伊红

美蓝

蒸馏水

pH

15 g

10 g

5 g

5 g

2 g

0.4 g

0. 065 g

1000 mL

7.2

    从培养基配方可以确定大肠杆菌的营养类型是                 ;从培养基功能可以确定其类型是              培养基,理由是                                    

3)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_______________________________________________________。

(2)大肠杆菌与基因工程。

大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的lacZ基因中。lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出b-半乳糖苷酶。当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被b-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达b-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因筛选重组质粒示意图。据图回答问题:

1)质粒结构特点是                      

2)作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因,原因是                            

3)试管Ⅱ中用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌,并在培养基中加入                                  

3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果:

                                                                              

                                                                               

(3)选择大肠杆菌作为研究材料,主要原因是:它体积小、结构简单、            

             等。

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科目:高中生物 来源:浙江省五校2009—2010学年度高三第一次联考(生物)试题 题型:综合题

大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出b-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被b-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达b-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题:

(1)作为受体大肠杆菌应__________________________,以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌,置于试管Ⅱ中,并加入          
(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入____________________等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。
(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果:
                                                          
                                                           

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科目:高中生物 来源:2014届浙江东阳中学高三10月月考生物试卷(解析版) 题型:选择题

大肠杆菌pUC118质粒具有氨苄青霉素抗性基因,某限制性核酸内切酶唯一切点位于该质粒的lacZ基因中。在特定的选择培养基中,若lacZ基因没有被破坏,则大肠杆菌菌落呈蓝色;若lacZ基因被破坏,则菌落呈白色。右图表示转基因操作过程。下列说法错误的是

A.作为受体大肠杆菌应不含氨苄青霉素抗性基因,以便于筛选

B.若大肠杆菌的菌落为蓝色,则质粒未导入大肠杆菌

C.选择培养基中除必需的营养物质外,还应加入适量氨苄青霉素

D.应选择白色菌落的大肠杆菌进行扩大培养

 

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科目:高中生物 来源:2012-2013学年浙江省高三第一次月考生物试卷(解析版) 题型:综合题

(6分)大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出b-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被b-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达b-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。右图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题:

(1)作为受体大肠杆菌应______________________,以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(目的是                        )过的受体大肠杆菌,置于试管Ⅱ中,并加入                     

(2)图中的培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入___________等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。

(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导

入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果:

                                                                        

                                                                        

 

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科目:高中生物 来源:浙江省五校2009—2010学年度高三第一次联考(生物)试题 题型:选择题

大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出b-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被b-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达b-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题:

   (1)作为受体大肠杆菌应__________________________,以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌,置于试管Ⅱ中,并加入          

   (2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入____________________等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。

   (3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果:

                                                          

                                                           

 

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