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    16．骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一．科研人员研究曲古抑菌A（TSA）对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制，为临床治疗寻找新方向．实验过程如下：
    步骤1用含青霉素和链霉素的高糖培养基，在37℃、5%CO2培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间．
    步骤2取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞，用加入不同浓度的TSA（0～200ng•mL-1）的培养基继续培养24h．
    步骤3对各组细胞进行抽样检测，检测方法是先用台盼蓝试剂（一种细胞活性染料）染色再用血细胞计数板计数，统计细胞存活率（未染色细胞数/细胞总数×100%），结果如图1．
    步骤4分别提取TSA浓度为0ng•mL-1、25ng•mL-1、50ng•mL-1处理的3组细胞，测量细胞中与凋亡相关的基因（Bax、Bcl-2）和β-肌动蛋白基因（不同的组织细胞中表达相对恒定）表达的蛋白质量并计算比值，结果如图2．

    分析回答：
    （1）骨肉瘤细胞的恶性增殖和转移与细胞膜上糖蛋白（成分）种类和数量的改变有关．高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是防止杂菌污染，细胞培养箱中保持5% CO2的作用是维持培养液pH．
    （2）步骤2中，设置0ng•mL-1 TSA实验的主要目的是排除非测试因素对实验结果的影响．
    （3）用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是活细胞的细胞膜具有选择透过性，台盼蓝不能进入活细胞内（死细胞膜失去选择透过性，台盼蓝能进入死细胞内）．
    （4）图1所示结果表明TSA浓度越高对骨肉瘤细胞凋亡的促进作用越强．
    （5）根据图2判断，骨肉瘤细胞中Bax基因过度表达会加速细胞凋亡．

    分析 分析图1可知，随着处理的TSA浓度增加骨肉瘤细胞的存活率下降，说明TSA浓度增加对骨肉瘤细胞凋亡的促进作用增强．分析图2可知，随着处理的TSA浓度增加，Bcl-2蛋白/β-肌动蛋白的比值降低．分析图3可知，随着处理的TSA浓度增加，Bax蛋白/β-肌动蛋白的比值升高．

    解答 解：（1）与正常成骨细胞相比，骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移，其主要原因是骨肉瘤细胞膜上的糖蛋白等物质减少．高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是防止杂菌污染，细胞培养箱中保持5% CO2的作用是维持培养液pH．
    （2）生物学实验中通常要调置对照实验，其中空白对照实验的作用是排除非测量因素（实验自变量以外的影响实验结果的因素）对实验结果的影响．
    （3）根据细胞存活率=末染色细胞数/细胞总数，可以活细胞不能被染色，即由于细胞膜具有选择透过性，台盼蓝不能进入活细胞，因此，台盼蓝是一种活性染色剂．
    （4）根据图1显示实验结果是随着处理的TSA浓度增加骨肉瘤细胞的存活率下降，说明TSA浓度增加对骨肉瘤细胞凋亡的促进作用增强，注意实验结果说明（结论）不等于实验结果．
    （5）图2实验结果显示，TSA浓度越高Bcl-2表达蛋白质越少，而Bax表达蛋白质越多，说明前者蛋白质是抑制细胞凋亡而后者旺盛表达促进细胞凋亡．
    故答案为：
    （1）糖蛋白  防止杂菌污染   维持培养液pH
    （2）排除非测试因素对实验结果的影响
    （3）活细胞的细胞膜具有选择透过性，台盼蓝不能进入活细胞内（死细胞膜失去选择透过性，台盼蓝能进入死细胞内）
    （4）TSA浓度越高对骨肉瘤细胞凋亡的促进作用越强  
    （5）Bax

    点评 本题主要考查动物细胞培养、细胞癌变等知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，准确判断问题的能力以及实验结果分析能力．本题在评讲中还可以围绕动物细胞培养条件等进行拓展复习．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源：2015-2016学年河南省郑州市高一上学期期末生物试卷（解析版） 题型：选择题

    下列是有关酶的叙述说法中正确的是（ ）

    ①酶是内分泌细胞产生的具有催化作用的有机物

    ②为了验证某种物质是消化酶，可用斐林试剂

    ③ATP水解酶的作用对象是ATP中的高能磷酸键

    ④酶的形成一般都要经过核糖体的合成，内质网、高尔基体加工、分泌

    ⑤酶的组成成分中有可能含有糖类

    A．有两个正确 B．有三个正确

    C．有四个正确 D．有五个正确

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    7．现有4个纯合南瓜品种，其中2个品种的果形表现为圆形（甲和乙），1个表现为扁盘形（丙），1个表现为长形（丁）．用这4个南瓜品种做了2组实验，结果如下：
    实验1：甲×乙，F1均为扁盘形，F2中扁盘：圆：长=9：6：1
    实验2：丙×丁，F1均为扁盘形，F2中扁盘：圆：长=9：6：1
    则下列有关叙述中，错误的是（　　）
    A．该南瓜果形的遗传受两对等位基因控制，且遵循基因的自由组合定律
    B．实验1中，F2圆形南瓜的基因型有4种
    C．实验2中，F2的扁盘形南瓜中与F1基因型相同的所占比例为$\frac{4}{9}$
    D．对实验2的F2中扁盘形南瓜进行测交，子代的表现型及比例为圆形：长形=3：1

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    4．如图是高等生物的生活史，请据图回答下列问题：
    （1）生物个体发育从受精卵开始，主要进行有丝分裂．
    （2）生物个体发育成熟后通过减数分裂产生配子，它发生在动物的精巢、卵巢．（填器官名称）中．
    （3）图中B过程表示受精作用．
    （4）高等动物的个体发育包括胚胎发育、胚后发育．
    （5）减数分裂和受精作用共同维持生物体前后代染色体数目的恒定，对遗传和变异具有重要意义．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    11．在双链DNA的分子中，有腺嘌呤P个，占全部碱基的比例为$\frac{N}{M}$（M＞2N），则该DNA分子中的鸟嘌呤的个体数目为（　　）
    A．$\frac{PM}{N-P}$B．$\frac{PM}{2N}$-PC．$\frac{PM}{2N}$D．P

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    1．如图为生产实践中的几种育种方法的示意图，请据图分析回答下面的问题．

    （1）图中①→④方向所示的育种方法是杂交育种，该育种方式的原理是基因重组．
    （2）图中①→②→③方向所示的育种方法是单倍体育种，其优点是明显缩短育种年限，过程②常用的方法是花药离体培养，获得单倍体植株．
    （3）⑤过程用射线处理的目的是使DNA分子中发生碱基对的替换、增添和缺失，从而引起其结构的改变，该过程一般用射线等因素来诱导，原因是这些因素能够诱导生物发生基因突变．
    （4）⑦过程的常用试剂是秋水仙素，该试剂的作用原理是抑制细胞有丝分裂前期纺锤体的形成，从而使细胞中染色体数目加倍．
    （5）高产的青霉菌菌株利用了诱变（⑤⑥）育种途径获得．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    8．在细胞分裂中，既有同源染色体，又有姐妹染色单体的时期是（　　）
    A．有丝分裂后期B．减数第一次分裂末期
    C．有丝分裂前期D．减数第二次分裂后期

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    5．如图1表示细胞分裂不同时期与每条染色体DNA含量变化的关系，图2 表示处于细胞分裂不同时期的细胞图象．

    （1）图1中AB段形成的原因是DNA复制，CD段形成的原因是着丝点分裂，姐妹染色单体分开．
    （2）图2中乙丙细胞处于图1中的BC段，甲细胞处于图1中的DE段．
    （3）图2中乙细胞名称初级卵母细胞其分裂产生的子细胞名称为次级卵母细胞和（第一）极体．
    （4）若该动物体细胞的基因型为YyRr，则图2中甲分裂形成的子细胞基因组成为YyRr．

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    科目：高中生物 来源： 题型：填空题

    6．请根据DNA分子复制的过程回答下列问题：
    （1）DNA分子的独特的双螺旋结构能够为复制DNA提供了精确的模板；它的碱基互补配对原则保证了复制准确无误的进行．
    （2）DNA复制的时间一般是有丝分裂间期和减数第一次分裂间期．
    （3）DNA复制时需要的原料是四种游离的脱氧核苷酸．
    （4）形成的新DNA分子含有一条母链和一条子链，因此，DNA分子的复制被称为半保留复制．

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