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    培养的哺乳动物细胞时，温度和pH大多以________为宜。


    1. A.
      36±0.5℃；Ph＝7.2～7.4
    2. B.
      36.5±0.5℃；Ph＝7.0～7.2
    3. C.
      36.5±0.5℃；Ph＝7.2～7.4
    4. D.
      36±0.5℃；Ph＝7.0～7.2
    C
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    科目：高中生物 来源：山西省山大附中2010-2011学年高二3月月考生物试题 题型：013

    培养的哺乳动物细胞时，温度和pH大多以________为宜。

    [　　]
    A．

    36±0.5℃；Ph＝7.2～7.4

    B．

    36.5±0.5℃；Ph＝7.0～7.2

    C．

    36.5±0.5℃；Ph＝7.2～7.4

    D．

    36±0.5℃；Ph＝7.0～7.2

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    科目：高中生物 来源： 题型：单选题

    下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，错误的是


    1. A.
      胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割
    2. B.
      移植胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响
    3. C.
      胚胎干细胞具有体积小、细胞核大、核仁明显等特点
    4. D.
      体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精

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    科目：高中生物 来源： 题型：阅读理解

    基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的一门新技术。实际上是一套组合分子生物学技术,包括基因重组、细胞分离培养、转基因技术等。80年代初，胚胎干细胞（ES细胞）分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年，首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年，Thompsson首次建立了完整的ES细胞基因敲除的小鼠模型。此后的几年中，基因敲除技术得到了进一步的发展和完善。 “基因敲除细胞”的构建过程如下：

    第一步：从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞（ES），在培养基中扩增。这些细胞中需要改造的基因称为“靶基因”。

    第二步：构建基因表达载体。取与靶基因序列同源的目的基因（同源臂），在同源臂上接入新霉素抵抗基因等。由于同源臂与靶基因的DNA正好配对，所以能像“准星”一样， 将表达载体准确地带到靶基因的位置。

    第三步：将表达载体导入胚胎干细胞，并与其内靶基因同源重组，完成胚胎干细胞的基因改造。

    第四步：基因改造后的胚胎干细胞增殖、筛选。

    基本原理如下图所示。

    请根据上述资料，回答下列问题：

    （1）“从小鼠囊胚中分离出胚胎干细胞（ES），在培养基中扩增”需要利用_______________酶处理使其成为_______________，再进行细胞培养；进行培养时，培养液中除葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素外，还要加入_______________。 “基因敲除技术”以胚胎干细胞作为受体细胞是因为胚胎干细胞具有          性。

    （2）在把与靶基因序列同源的目的基因导入受体细胞前，应首先完成           ，在这

    过程中所需要的工具酶是                。

    （3）基因改造后的胚胎干细胞需要筛选，是一项的非常重要工作，原因是              。

    （4）“基因基因敲除技术” 应用到DNA同源重组原理涉及的变异类型实际上是         。

    （5）如果通过上图表示的过程，获得一枚“敲除”一个靶基因的胚胎干细胞，并培养成一只克隆小鼠，获得的小鼠，通过有性生殖产生的后代是否都含该目的基因？为什么?  

          ，                                                                 。

    （6）上述资料中新霉素抵抗基因的作用最可能是              。

    （7）科学家利用“基因敲除”技术进行研究时，对照组是_______________。由于实验动物的基因组中_______________，所以通过实验动物与正常动物性状的比较，能够发现实验动物的_______________，从而确定被敲除基因的功能。

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    科目：高中生物 来源：2014届吉林省白山市高三8月摸底考试理科综合生物试卷 题型：综合题

     下图是培养生产药物的乳腺生物反应器转基因动物的过程，请完成下列各题。

    （1）研究表明，在共转染中，能够摄入DNA的哺乳动物细胞，可将两种互不相连的质粒能以很高的频率(>90%)摄入细胞。由此可以认为，图中共转染过程能够将              基因和目的基因同时导入同一个细胞。②中是根据        基因表达的性状筛选出的细胞。

    （2）①是含有人凝血因子Ⅸ基因的质粒，在基因工程中该分子依据所起到作用被称为      。为了使凝血因子Ⅸ基因在羊恰当的细胞中表达，a片段应为羊           启动子，其是        识别和结合的位点。

    （3）从白脸羊体内分离出的细胞要经过胰蛋白酶或         酶处理再进行培养，培养时要考虑        的环境；营养；温度、pH和          环境等外部条件。

    （4）③表示                细胞，⑥表示的胚胎是             。图中电激的作用是促进          。

    （5）⑥在受体母羊子宫内正常发育的生理基础是：第一，受体为胚胎提供正常发育的生理环境；第二，受体对移入子宫的胚胎基本上不发生             反应；第三，供体胚胎可与受体子宫建立正常的         联系。

     

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